LN-18
Cell line · Product number 305822
LN-18 is a human malignant glioma cell line originally derived from a temporal lobe tumor of an adult male patient diagnosed with glioblastoma multiforme ...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
LN-18 הוא קו תאים של גליומה ממאירה אנושית שמקורו בגידול באונה הטמפורלית של גבר בוגר שאובחן עם גליובלסטומה מולטיפורמה (דרגה IV לפי סולם קרנוהן). הקו הוקם במבחנה ונשמר במשך למעלה מ-115 מעברים בתרבית חד-שכבתית. תאי LN-18 מציגים מורפולוגיה דו-קוטבית או כוכבית עם גרעינים פליומורפיים, וזמן הכפלתם הוא כ-72 שעות. למרות שתרביות מוקדמות וחומר ביופסיה ביטאו חלבון חומצי פיברילרי גליאלי (GFAP), לא נצפתה סינתזה של GFAP במעברים מאוחרים יותר. עם זאת, המקור הגליאלי של התאים אושר באמצעות ניתוח אולטרא-מבני. תאי LN-18 הראו גם נוכחות של אנטיגנים דמויי Ia על פני השטח שלהם והיו מסוגלים לסנתז רמות גבוהות של פיברונקטין, שתי תכונות הרלוונטיות לפתולוגיה של גליומה ולאינטראקציות בין הגידול למאכסן.
מבחינת יכולת גידולי, תאי LN-18 מסוגלים ליצור גידולים מוצקים כאשר הם מוזרקים לעכברים עירומים, והגידולים המתקבלים ניתנים להשתלה והם דומים מבחינה היסטולוגית לגליובלסטומה המקורית. ניתוח קריוטיפי גילה נוכחות של שלושה כרומוזומים סמנים עקביים, המספקים טביעת אצבע ציטוגנטית עבור קו התאים. למרות היעדר חלבון GFAP או S-100 זיהוי במעברים מאוחרים יותר, קו LN-18 נותר מודל חשוב לחקר הביולוגיה של גליומה אנושית, במיוחד בהקשר לביטוי אנטיגנים על פני התא, תאימות וקשרי מטריקס חוץ-תאיים באמצעות ייצור פיברונקטין. קו התאים גם בעל מאפייני צמיחה יציבים וניתן לשימור בקירור, מה שהופך אותו מתאים לשימוש ניסיוני לטווח ארוך.
- Tissue
- מוח, אונה זמנית ימנית
- Disease
- גליובלסטומה
- Synonyms
- LN 18
- LN18
- LN018
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Tumourigenic
- כן; כן, יוצר גידולים בעכברים עירומים
- Doubling time
- 72 שעות
04Identifiers
- Citation
- LN-18 (מספר קטלוגי Cytion 305822)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0392
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- HLA A2, A9, B5, BW35, DRW3
- Oncogenes
- P53+ (מוטציה, TGT (Cys) --> TCT (Ser) מוטציה בקודון 238); PTEN+ (סוג בר); p16- (נמחק); p14ARF- (נמחק)
- Mutational profile
- מוטציה: מחיקת גן, CDKN2A, הומוזיגוטי. מוטציה, PIK3CB, פשוטה, p.Glu1051Lys (c.3151G>A), הומוזיגוטי, TP53, פשוטה, p.Cys238Ser (c.713G>C), הומוזיגוטי
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 5% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 61 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Disclaimer
- התאים שלנו מיועדים אך ורק למטרות מחקר במעבדה במבחנה, ואינם מיועדים לשימוש קליני או אבחוני, ולא מיועדים לטיפול בבני אדם או לשימוש וטרינרי. על המשתמשים להקפיד על כל ההנחיות והתקנות החלות על טיפול ושימוש בתאים אלה בסביבת מחקר.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
