LN-18

LN-18 je lidská maligní gliomová buněčná linie původně odvozená z nádoru temporálního laloku dospělého muže s diagnózou multiformního glioblastomu (Kernohanův stupeň IV). Linie byla vytvořena in vitro a byla udržována po více než 115 pasáží v monovrstevné kultuře. Buňky LN-18 vykazují bipolární nebo hvězdicovitou morfologii s pleomorfními jádry a mají dobu zdvojení přibližně 72 hodin. Ačkoli rané kultury a bioptický materiál exprimovaly gliální fibrilární kyselý protein (GFAP), v pozdějších pasážích nebyla syntéza GFAP pozorována. Gliový původ buněk byl však potvrzen ultrastrukturální analýzou. Buňky LN-18 rovněž vykazovaly na svém povrchu přítomnost antigenů podobných Ia a byly schopny syntetizovat vysoké množství fibronektinu, což jsou vlastnosti důležité pro patologii gliomu a interakce mezi nádorem a hostitelem.

Z hlediska tumorigenity jsou buňky LN-18 schopny vytvářet solidní nádory po injekci do nahých myší, přičemž výsledné nádory jsou transplantovatelné a histologicky podobné původnímu glioblastomu. Karyotypová analýza odhalila přítomnost tří konzistentních markerových chromozomů, které poskytují cytogenetický otisk buněčné linie. Navzdory absenci detekovatelného proteinu GFAP nebo S-100 v pozdějších pasážích zůstává linie LN-18 cenným modelem pro studium biologie lidského gliomu, zejména ve vztahu k expresi povrchových antigenů buněk, tumorigenitě a interakcím s extracelulární matrix prostřednictvím produkce fibronektinu. Tato buněčná linie má také stabilní růstové vlastnosti a je vhodná pro kryokonzervaci, takže je vhodná pro dlouhodobé experimentální použití.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení