LN-18

LN-18 on ihmisen pahanlaatuinen glioomasolulinja, joka on alun perin peräisin aikuisen miespotilaan ohimolohkokasvaimesta, jolla oli diagnosoitu glioblastoma multiforme (Kernohanin aste IV). Linja perustettiin in vitro, ja sitä on ylläpidetty yli 115 solukerroksen ajan yksikerrosviljelmässä. LN-18-soluilla on bipolaarinen tai tähtimäinen morfologia ja pleomorfiset tumat, ja niiden kaksinkertaistumisaika on noin 72 tuntia. Vaikka varhaiset viljelmät ja biopsiamateriaali ilmentävät gliafibrillaarista happoproteiinia (GFAP), GFAP-synteesiä ei havaittu myöhemmissä vaiheissa. Solujen gliaalinen alkuperä vahvistettiin kuitenkin ultrastruktuurianalyysin avulla. LN-18-soluissa havaittiin myös Ia-antigeenien kaltaisia antigeenejä niiden pinnalla ja ne kykenivät syntetisoimaan suuria määriä fibronektiinia, jotka molemmat ovat tärkeitä gliooman patologian ja kasvaimen ja isännän vuorovaikutuksen kannalta.

Kasvainvaikuttavuuden osalta LN-18-solut kykenevät muodostamaan kiinteitä kasvaimia, kun ne injektoidaan alasti eläviin hiiriin, jolloin syntyneet kasvaimet ovat siirrettävissä ja histologisesti samanlaisia kuin alkuperäinen glioblastooma. Karyotyyppinen analyysi paljasti kolme yhdenmukaista merkkikromosomia, mikä antaa solulinjalle sytogeneettisen sormenjäljen. Vaikka GFAP- tai S-100-proteiinia ei ollut havaittavissa myöhemmissä läpikäynneissä, LN-18-solulinja on edelleen arvokas malli ihmisen gliooman biologian tutkimiseen, erityisesti solujen pinta-antigeenien ilmentymisen, kasvainten muodostumisen ja solunulkoisen matriksin vuorovaikutusten osalta fibronektiinin tuotannon kautta. Solulinjalla on myös vakaat kasvuominaisuudet ja se on kryosäilytettävissä, joten se soveltuu pitkäaikaiseen kokeelliseen käyttöön.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa