Gå direkt till innehållet
LN-18
Vävnad
Hjärna, höger temporallob
Sjukdom
Glioblastom
Synonymer
LN 18, LN18, LN018

LN-18

Cell line · Produktnummer 305822

LN-18 är en cellinje från ett malignt gliom hos människa, som ursprungligen härstammar från en tumör i tinningloben hos en vuxen manlig patient som diagnostiserats med glioblastoma multiforme ...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

LN-18 är en human malign gliomcellinje som ursprungligen härrör från en tumör i tinningloben hos en vuxen manlig patient som diagnostiserats med glioblastoma multiforme (Kernohan grad IV). Linjen etablerades in vitro och har bibehållits i över 115 passager i monolagerkultur. LN-18-cellerna uppvisar bipolära eller stellata morfologier med pleomorfa kärnor och har en fördubblingstid på cirka 72 timmar. Även om tidiga kulturer och biopsimaterial uttryckte glial fibrillary acidic protein (GFAP), observerades ingen GFAP-syntes i senare passager. Cellernas gliala ursprung bekräftades dock via ultrastrukturell analys. LN-18-cellerna visade också förekomst av Ia-liknande antigener på ytan och kunde syntetisera höga nivåer av fibronektin, båda egenskaper som är relevanta för gliompatologi och interaktioner mellan tumör och värd.

När det gäller tumörframkallande förmåga kan LN-18-celler bilda solida tumörer när de injiceras i nakenmöss, och de resulterande tumörerna är transplanterbara och histologiskt lika det ursprungliga glioblastomet. Karyotypisk analys avslöjade förekomsten av tre konsekventa markörkromosomer, vilket ger ett cytogenetiskt fingeravtryck för cellinjen. Trots avsaknaden av detekterbart GFAP- eller S-100-protein i senare passager förblir LN-18-linjen en värdefull modell för att studera biologin hos humana gliom, särskilt när det gäller uttryck av cellyteantigener, tumörbildning och interaktioner med extracellulär matris genom fibronektinproduktion. Cellinjen har också stabila tillväxtegenskaper och kan kryobevaras, vilket gör den lämplig för långsiktig experimentell användning.

Vävnad
Hjärna, höger temporallob
Sjukdom
Glioblastom
Synonymer
  • LN 18
  • LN18
  • LN018

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Tumörframkallande
Ja; Ja, bildar tumörer i nakna möss
Fördubblingstid
72 timmar

04Identifierare

Källa
LN-18 (Cytion katalognummer 305822)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0392

05Uttryck och mottaglighet

Antigenuttryck
HLA A2, A9, B5, BW35, DRW3
Onkogener
P53+ (muterad, TGT (Cys) --> TCT (Ser)-mutation vid kodon 238); PTEN+ (vildtyp); p16- (borttagen); p14ARF- (borttagen)
Mutationsprofil
Mutation: Deletion av gen, CDKN2A, homozygot. Mutation, PIK3CB, Simple, p.Glu1051Lys (c.3151G>A), homozygot, TP53, Simple, p.Cys238Ser (c.713G>C), homozygot

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 5% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
61 år
Etnicitet
Kaukasisk