Zum Inhalt springen
LN-18
Gewebe
Gehirn, rechter Schläfenlappen
Krankheit
Glioblastom
Synonyme
LN 18, LN18, LN018

Dokumente

LN-18

Cell line · Artikelnummer 305822

LN-18 ist eine menschliche maligne Gliom-Zelllinie, die ursprünglich aus einem Tumor im Temporallappen eines erwachsenen männlichen Patienten gewonnen wurde, bei dem ein Glioblastoma multiforme diagnostiziert worden war …

€430.00zzgl. MwSt. und Versandkosten

Anpassung / Empfehlungen

Auf Lager
Charge
Empfohlen (frischeste Charge)
  • CoA
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

LN-18 ist eine humane maligne Gliomzelllinie, die ursprünglich aus einem Schläfenlappentumor eines erwachsenen männlichen Patienten mit der Diagnose Glioblastoma multiforme (Kernohan Grad IV) stammt. Die Linie wurde in vitro etabliert und über 115 Passagen in Monolayerkultur gehalten. LN-18-Zellen weisen eine bipolare oder sternförmige Morphologie mit pleomorphen Kernen auf und haben eine Verdopplungszeit von etwa 72 Stunden. Obwohl frühe Kulturen und Biopsiematerial gliales fibrilläres saures Protein (GFAP) exprimierten, wurde in späteren Passagen keine GFAP-Synthese mehr beobachtet. Der gliale Ursprung der Zellen wurde jedoch durch ultrastrukturelle Analysen bestätigt. LN-18-Zellen wiesen außerdem Ia-ähnliche Antigene auf ihrer Oberfläche auf und waren in der Lage, hohe Mengen an Fibronektin zu synthetisieren, beides Merkmale, die für die Gliompathologie und die Interaktion zwischen Tumor und Wirt von Bedeutung sind.

Was die Tumorigenität betrifft, so sind die LN-18-Zellen in der Lage, solide Tumore zu bilden, wenn sie in Nacktmäuse injiziert werden, wobei die entstehenden Tumore transplantierbar sind und histologisch dem ursprünglichen Glioblastom ähneln. Die karyotypische Analyse ergab das Vorhandensein von drei konsistenten Markerchromosomen, die einen zytogenetischen Fingerabdruck für die Zelllinie darstellen. Trotz des Fehlens von nachweisbarem GFAP- oder S-100-Protein in späteren Passagen bleibt die LN-18-Linie ein wertvolles Modell für die Untersuchung der Biologie des menschlichen Glioms, insbesondere in Bezug auf die Expression von Zelloberflächenantigenen, die Tumorigenität und die Interaktion mit der extrazellulären Matrix durch die Fibronektinproduktion. Die Zelllinie besitzt außerdem stabile Wachstumseigenschaften und lässt sich gut kryokonservieren, so dass sie sich für Langzeitversuche eignet.

Gewebe
Gehirn, rechter Schläfenlappen
Krankheit
Glioblastom
Synonyme
  • LN 18
  • LN18
  • LN018

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Tumorauslösend
Ja; Ja, bildet Tumore in Nacktmäusen
Verdopplungszeit
72 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
LN-18 (Cytion-Katalognummer 305822)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0392

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
HLA A2, A9, B5, BW35, DRW3
Onkogene
P53+ (mutiert, TGT (Cys) --> TCT (Ser) Mutation bei Codon 238); PTEN+ (Wildtyp); p16- (gelöscht); p14ARF- (gelöscht)
Mutationsprofil
Mutation: Gendeletion, CDKN2A, Homozygot. Mutation, PIK3CB, Einfach, p.Glu1051Lys (c.3151G>A), Homozygot, TP53, Einfach, p.Cys238Ser (c.713G>C), Homozygot

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 5% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
61 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch