LN-18

LN-18 هو خط خلايا ورم دبقي خبيث بشري خبيث مشتق في الأصل من ورم الفص الصدغي لمريض بالغ ذكر تم تشخيص إصابته بورم أرومي دبقي متعدد الأشكال (الدرجة الرابعة من كيرنوهان). تم إنشاء هذا الخط في المختبر وتم الحفاظ عليه لأكثر من 115 ممر في مزرعة أحادية الطبقة. تُظهر خلايا LN-18 أشكالاً ثنائية القطب أو نجمية مع نوى متعددة الأشكال ولها وقت مضاعفة يبلغ حوالي 72 ساعة. على الرغم من أن المستنبتات المبكرة ومواد الخزعة عبرت عن البروتين الحمضي الليفي الدبقي الليفي (GFAP)، لم يُلاحظ تخليق البروتين الحمضي الليفي الدبقي في الممرات اللاحقة. ومع ذلك، تم التأكد من الأصل الدبقي للخلايا من خلال التحليل فوق البنيوي. كما أظهرت خلايا LN-18 أيضاً وجود مستضدات شبيهة ببروتين Ia على سطحها وكانت قادرة على تخليق مستويات عالية من الفبرونكتين، وكلاهما من السمات ذات الصلة بعلم أمراض الورم الدبقي والتفاعلات بين الورم والمضيف.

ومن حيث التكاثر الورمي، كانت خلايا LN-18 قادرة على تكوين أورام صلبة عند حقنها في فئران عارية، وكانت الأورام الناتجة قابلة للزرع ومشابهة من الناحية النسيجية للورم الأرومي الدبقي الأصلي. كشف تحليل النمط النووي عن وجود ثلاثة كروموسومات علامات متناسقة، مما يوفر بصمة خلوية جينية خلوية لخط الخلايا. على الرغم من عدم وجود بروتين GFAP أو بروتين S-100 القابل للاكتشاف في الممرات اللاحقة، يظل خط LN-18 نموذجاً قيماً لدراسة بيولوجيا الورم الدبقي البشري، خاصة فيما يتعلق بالتعبير عن مستضد سطح الخلية، والتفاعل الورمي، وتفاعلات المصفوفة خارج الخلية من خلال إنتاج الفبرونكتين. كما يمتلك خط الخلايا أيضاً خصائص نمو مستقرة وقابلة للحفظ بالتبريد، مما يجعله مناسباً للاستخدام التجريبي طويل الأمد.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان