LN-18

LN-18 on inimese pahaloomuline glioomi rakuliin, mis on algselt saadud täiskasvanud meessoost patsiendi temporaalluuma kasvajast, kellel diagnoositi glioblastoma multiform (Kernohani IV aste). Liin loodi in vitro ja seda on hoitud üle 115 läbimise monokihilises kultuuris. LN-18 rakkudel on bipolaarne või stellaatne morfoloogia koos pleomorfsete tuumadega ja nende kahekordistumisaeg on ligikaudu 72 tundi. Kuigi varajased kultuurid ja biopsiamaterjal väljendasid gliafibrillaarset happelist valku (GFAP), ei täheldatud GFAP sünteesi hilisemates kasvuperioodides. Siiski kinnitati rakkude gliaalset päritolu ultrastruktuurse analüüsi abil. LN-18 rakud näitasid oma pinnal ka Ia-taoliste antigeenide olemasolu ja olid võimelised sünteesima suurel hulgal fibronektiini, mis on mõlemad olulised glioomi patoloogia ja kasvaja ja peremeesorganismi interaktsioonide seisukohast.

LN-18 rakud on võimelised moodustama alasti hiirtele süstituna soliidseid kasvajaid, kusjuures saadud kasvajad on siirdatavad ja histoloogiliselt sarnanevad algse glioblastoomiga. Karyotüüpiline analüüs näitas kolme järjepideva markerkromosoomi olemasolu, mis annab rakuliinile tsütogeneetilise sõrmejälje. Hoolimata sellest, et hilisemates faasides ei olnud GFAP või S-100 valk tuvastatav, on LN-18 liin endiselt väärtuslik mudel inimese glioomi bioloogia uurimiseks, eriti seoses rakupinna antigeenide ekspressiooni, kasvajate tekkepõhisuse ja rakuvälise maatriksi interaktsioonidega fibronektiini tootmise kaudu. Rakuliinil on ka stabiilsed kasvuomadused ja see on krüokonserveeritav, mistõttu sobib see pikaajaliseks eksperimentaalseks kasutamiseks.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest