Aller directement au contenu
FS-C3H
Tissu
Peau
Maladie
Fibrosarcome

Documents

FS-C3H

Cell line · Référence du produit 400418

The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...

€800.00hors taxes et frais de port
En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire FS-C3H, dérivée de la souche de souris C3H/HeJ, joue un rôle essentiel dans l'étude des réponses de l'hôte aux endotoxines, en particulier dans le contexte de la recherche sur le cancer. Cette souche se distingue par sa résistance à l'endotoxine due à une insensibilité spécifique au lipopolysaccharide (LPS), un composant majeur de l'endotoxine bactérienne. Cette caractéristique a fait de FS-C3H un modèle inestimable pour disséquer les voies biochimiques et génétiques impliquées dans la régulation de la réponse immunitaire. Les chercheurs ont largement utilisé cette lignée cellulaire pour examiner la dynamique des lymphocytes B et des macrophages, en se concentrant sur leur non-réponse unique au LPS, qui contraste avec les réactions typiques des cellules immunitaires à de tels stimuli.

La non-réponse des cellules FS-C3H au LPS est attribuée à l'absence ou à l'altération d'un récepteur crucial responsable de la transduction du signal LPS. Des études ont montré que malgré la non-réactivité au LPS, ces cellules peuvent être activées par des voies alternatives telles que les mécanismes de signalisation de la protéine kinase C (PKC) et de la tyrosine kinase, similaires à ceux activés dans les cellules répondant au LPS. L'interaction et les rôles régulateurs de ces kinases dans les voies de signalisation mettent en évidence des mécanismes intracellulaires complexes, suggérant que les voies PKC et tyrosine kinase pourraient compenser la signalisation défectueuse du LPS. Cette observation ouvre la voie à l'exploration de la manière dont la phosphorylation modulée par la tyrosine kinase affecte les réponses cellulaires globales chez ces souris.

La poursuite des recherches sur les cellules FS-C3H est essentielle pour comprendre la base moléculaire de leur hyporéactivité au LPS, potentiellement liée à un défaut génétique dans le gène Lpsn. En étudiant les profils de phosphorylation de ces cellules par rapport à celles qui répondent au LPS, les scientifiques cherchent à élucider les défauts moléculaires spécifiques qui entraînent une altération de l'activation des gènes et des réponses à la prolifération. L'isolement et la caractérisation du produit génique responsable de l'interaction avec le LPS pourraient permettre de mieux comprendre les dysfonctionnements du système immunitaire et ouvrir la voie à de nouvelles approches thérapeutiques dans le traitement des troubles immunitaires et inflammatoires connexes.

Tissu
Peau
Maladie
Fibrosarcome

02Classification

Organisme
Souris
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Identifiants

Référence
FS-C3H (numéro de catalogue Cytion 400418)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5755

04Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
2 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

06Donateur

Race / sous-espèce
C3H