الانتقال إلى المحتوى
FS-C3H
الأنسجة
البشرة
المرض
الساركوما الليفية

المستندات

FS-C3H

Cell line · رقم المنتج 400418

The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف

يلعب الخط الخلوي FS-C3H، المشتق من سلالة الفأر C3H/HeJ، دوراً محورياً في دراسة استجابات المضيف للسموم الداخلية، خاصة في سياق أبحاث السرطان. وتتميز هذه السلالة بمقاومتها للسموم الداخلية بسبب عدم حساسيتها تجاه عديد السكاريد الشحمي (LPS)، وهو مكون رئيسي للسموم الداخلية البكتيرية. وقد جعلت هذه الخاصية من سلالة FS-C3H نموذجًا لا يقدر بثمن لتشريح المسارات الكيميائية الحيوية والوراثية المشاركة في تنظيم الاستجابة المناعية. وقد استخدم الباحثون هذا الخط الخلوي على نطاق واسع لفحص ديناميكيات الخلايا اللمفاوية البائية والخلايا الضامة، مع التركيز على عدم استجابتها الفريدة من نوعها ل LPS، والتي تتناقض مع ردود فعل الخلايا المناعية النموذجية لمثل هذه المحفزات.

ويُعزى عدم استجابة خلايا FS-C3H لخلايا FS-C3H إلى غياب أو تغيير مستقبلات حاسمة مسؤولة عن نقل إشارة LPS. وقد أظهرت الدراسات أنه على الرغم من عدم الاستجابة لـ LPS، يمكن تنشيط هذه الخلايا من خلال مسارات بديلة مثل آليات إشارات البروتين كيناز C (PKC) والتيروزين كيناز، على غرار تلك التي يتم تنشيطها في الخلايا المستجيبة لـ LPS. يسلط التفاعل والأدوار التنظيمية لهذه الكينازات في مسارات الإشارات الضوء على الآليات المعقدة داخل الخلايا، مما يشير إلى أن مسارات بروتين كيناز ج والتيروزين كيناز يمكن أن تعوض عن إشارات LPS المعيبة. وتفتح هذه الملاحظة آفاقًا لاستكشاف كيفية تأثير الفسفرة المعدلة بالتيروزين كيناز على الاستجابات الخلوية الكلية في هذه الفئران.

إن مواصلة البحث على خلايا FS-C3H أمر بالغ الأهمية لفهم الأساس الجزيئي لنقص استجابتها ل LPSN، والذي من المحتمل أن يكون مرتبطًا بخلل جيني في جين Lpsn. ويهدف العلماء، من خلال الخوض في ملامح الفسفرة في هذه الخلايا مقارنةً بالخلايا المستجيبة لجين LPSN، إلى كشف العيوب الجزيئية المحددة التي تؤدي إلى تغيير تنشيط الجينات واستجابات التكاثر. ويمكن لعزل وتوصيف المنتج الجيني المسؤول عن التفاعل مع LPS أن يوفر رؤى أعمق في اختلالات الجهاز المناعي ويمهد الطريق لمقاربات علاجية جديدة في علاج الاضطرابات المناعية والالتهابية ذات الصلة.

الأنسجة
البشرة
المرض
الساركوما الليفية

02التصنيف

كائن حي
الماوس
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03المعرّفات

المرجع
FS-C3H (كتالوج سايتون رقم 400418)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_5755

04التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
2 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

06المانح

السلالة / النوع الفرعي
C3H