FS-C3H

A linhagem celular FS-C3H, derivada da linhagem de camundongos C3H/HeJ, desempenha um papel fundamental no estudo das respostas do hospedeiro às endotoxinas, particularmente no contexto da pesquisa sobre o câncer. Essa linhagem se destaca por sua resistência à endotoxina, devido a uma insensibilidade específica ao lipopolissacarídeo (LPS), um dos principais componentes da endotoxina bacteriana. Essa característica tornou a FS-C3H um modelo inestimável para a análise das vias bioquímicas e genéticas envolvidas na regulação da resposta imunológica. Pesquisadores têm utilizado extensivamente essa linhagem celular para examinar a dinâmica dos linfócitos B e dos macrófagos, com foco em sua singular falta de resposta ao LPS, o que contrasta com as reações típicas das células imunológicas a tais estímulos.

A falta de resposta das células FS-C3H ao LPS é atribuída à ausência ou alteração de um receptor crucial responsável pela transdução do sinal do LPS. Estudos demonstraram que, apesar da não reatividade ao LPS, essas células podem ser ativadas por meio de vias alternativas, como os mecanismos de sinalização da proteína quinase C (PKC) e da tirosina quinase, semelhantes aos ativados em células responsivas ao LPS. A interação e os papéis regulatórios dessas quinases nas vias de sinalização destacam mecanismos intracelulares complexos, sugerindo que as vias da PKC e da tirosina quinase poderiam compensar a sinalização defeituosa do LPS. Essa observação abre caminhos para explorar como a fosforilação modulada pela tirosina quinase afeta as respostas celulares gerais nesses camundongos.

A continuidade das pesquisas com células FS-C3H é fundamental para compreender a base molecular de sua hiporresponsividade ao LPS, potencialmente ligada a um defeito genético no gene Lpsn. Ao investigar os perfis de fosforilação dessas células em comparação com as que respondem ao LPS, os cientistas buscam desvendar os defeitos moleculares específicos que levam à alteração da ativação gênica e das respostas de proliferação. O isolamento e a caracterização do produto gênico responsável pela interação com o LPS poderiam fornecer insights mais profundos sobre as disfunções do sistema imunológico e abrir caminho para novas abordagens terapêuticas no tratamento de distúrbios imunológicos e inflamatórios relacionados.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.