FS-C3H
Cell line · Številka izdelka 400418
The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...
Prilagajanje / Priporočila
- FS-C3HCell line€800.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
Celična linija FS-C3H, pridobljena iz seva miši C3H/HeJ, ima ključno vlogo pri preučevanju odzivov gostitelja na endotoksine, zlasti v okviru raziskav raka. Ta sev se odlikuje po odpornosti na endotoksin zaradi specifične neobčutljivosti na lipopolisaharid (LPS), ki je glavna sestavina bakterijskega endotoksina. Zaradi te lastnosti je FS-C3H postal neprecenljiv model za raziskovanje biokemičnih in genetskih poti, ki so vključene v uravnavanje imunskega odziva. Raziskovalci so to celično linijo pogosto uporabljali za preučevanje dinamike limfocitov B in makrofagov, pri čemer so se osredotočili na njihovo edinstveno neodzivnost na LPS, ki je v nasprotju z značilnimi reakcijami imunskih celic na takšne dražljaje.
Neodzivnost celic FS-C3H na LPS pripisujejo odsotnosti ali spremembi ključnega receptorja, ki je odgovoren za prenos signala LPS. Študije so pokazale, da se kljub neodzivnosti na LPS te celice lahko aktivirajo po alternativnih poteh, kot so signalni mehanizmi protein kinaze C (PKC) in tirozin kinaze, podobni tistim, ki se aktivirajo v celicah, odzivnih na LPS. Interakcija in regulativne vloge teh kinaz v signalnih poteh poudarjajo zapletene znotrajcelične mehanizme, kar nakazuje, da bi lahko poti PKC in tirozin kinaze nadomestile pomanjkljivo signalizacijo LPS. To opažanje odpira možnosti za raziskovanje, kako fosforilacija, modulirana s tirozin kinazami, vpliva na splošne celične odzive pri teh miših.
Nadaljnje raziskave na celicah FS-C3H so ključnega pomena za razumevanje molekularne osnove njihove neodzivnosti na LPS, ki je morda povezana z genetsko okvaro gena Lpsn. Z raziskovanjem profilov fosforilacije teh celic v primerjavi s celicami, ki se odzivajo na LPS, želijo znanstveniki razkriti posebne molekularne napake, ki vodijo do spremenjene aktivacije genov in proliferacijskih odzivov. Izolacija in karakterizacija genskega produkta, odgovornega za interakcijo z LPS, bi lahko zagotovila globlji vpogled v motnje v delovanju imunskega sistema in utrla pot novim terapevtskim pristopom pri zdravljenju povezanih imunskih in vnetnih motenj.
- Tkivo
- Koža
- Bolezen
- Fibrosarkom
02Razvrstitev
- Organizem
- Miška
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Identifikatorji
- Navajanje vira
- FS-C3H (Cytionova kataloška številka 400418)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5755
04Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Gostota setve
- 2 x 104 celic/cm2
- Obnova tekočine
- 2 do 3-krat na teden
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
06Donator
- Pasma / podvrsta
- C3H
07Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Izjava o omejitvi odgovornosti
- Naše celice so na voljo izključno za laboratorijske raziskave in vitro in niso namenjene za klinično ali diagnostično uporabo, niti jih ni dovoljeno dajati ljudem ali uporabljati v veterinarske namene. Uporabniki morajo upoštevati vse veljavne smernice in predpise za ravnanje in uporabo teh celic v raziskovalnem okolju.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da
.jpg)