Preskoči na vsebino
FS-C3H
Tkivo
Koža
Bolezen
Fibrosarkom

Dokumenti

FS-C3H

Cell line · Številka izdelka 400418

The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija FS-C3H, pridobljena iz seva miši C3H/HeJ, ima ključno vlogo pri preučevanju odzivov gostitelja na endotoksine, zlasti v okviru raziskav raka. Ta sev se odlikuje po odpornosti na endotoksin zaradi specifične neobčutljivosti na lipopolisaharid (LPS), ki je glavna sestavina bakterijskega endotoksina. Zaradi te lastnosti je FS-C3H postal neprecenljiv model za raziskovanje biokemičnih in genetskih poti, ki so vključene v uravnavanje imunskega odziva. Raziskovalci so to celično linijo pogosto uporabljali za preučevanje dinamike limfocitov B in makrofagov, pri čemer so se osredotočili na njihovo edinstveno neodzivnost na LPS, ki je v nasprotju z značilnimi reakcijami imunskih celic na takšne dražljaje.

Neodzivnost celic FS-C3H na LPS pripisujejo odsotnosti ali spremembi ključnega receptorja, ki je odgovoren za prenos signala LPS. Študije so pokazale, da se kljub neodzivnosti na LPS te celice lahko aktivirajo po alternativnih poteh, kot so signalni mehanizmi protein kinaze C (PKC) in tirozin kinaze, podobni tistim, ki se aktivirajo v celicah, odzivnih na LPS. Interakcija in regulativne vloge teh kinaz v signalnih poteh poudarjajo zapletene znotrajcelične mehanizme, kar nakazuje, da bi lahko poti PKC in tirozin kinaze nadomestile pomanjkljivo signalizacijo LPS. To opažanje odpira možnosti za raziskovanje, kako fosforilacija, modulirana s tirozin kinazami, vpliva na splošne celične odzive pri teh miših.

Nadaljnje raziskave na celicah FS-C3H so ključnega pomena za razumevanje molekularne osnove njihove neodzivnosti na LPS, ki je morda povezana z genetsko okvaro gena Lpsn. Z raziskovanjem profilov fosforilacije teh celic v primerjavi s celicami, ki se odzivajo na LPS, želijo znanstveniki razkriti posebne molekularne napake, ki vodijo do spremenjene aktivacije genov in proliferacijskih odzivov. Izolacija in karakterizacija genskega produkta, odgovornega za interakcijo z LPS, bi lahko zagotovila globlji vpogled v motnje v delovanju imunskega sistema in utrla pot novim terapevtskim pristopom pri zdravljenju povezanih imunskih in vnetnih motenj.

Tkivo
Koža
Bolezen
Fibrosarkom

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Identifikatorji

Navajanje vira
FS-C3H (Cytionova kataloška številka 400418)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5755

04Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
2 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

06Donator

Pasma / podvrsta
C3H