FS-C3H
Cell line · Číslo výrobku 400418
The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...
Přizpůsobení / Doporučení
- FS-C3HCell line€800.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
Buněčná linie FS-C3H, odvozená z myšího kmene C3H/HeJ, hraje klíčovou roli při studiu reakcí hostitele na endotoxiny, zejména v kontextu výzkumu rakoviny. Tento kmen se vyznačuje odolností vůči endotoxinu díky specifické necitlivosti na lipopolysacharid (LPS), hlavní složku bakteriálního endotoxinu. Díky této vlastnosti se FS-C3H stal neocenitelným modelem pro zkoumání biochemických a genetických drah zapojených do regulace imunitní odpovědi. Výzkumníci tuto buněčnou linii hojně využívali ke zkoumání dynamiky B lymfocytů a makrofágů se zaměřením na jejich jedinečnou nereaktivitu na LPS, která kontrastuje s typickými reakcemi imunitních buněk na takové podněty.
Nereaktivita buněk FS-C3H na LPS se přisuzuje absenci nebo změně klíčového receptoru zodpovědného za přenos signálu LPS. Studie ukázaly, že navzdory nereaktivitě na LPS mohou být tyto buňky aktivovány alternativními cestami, jako jsou proteinkináza C (PKC) a tyrozinkinázové signální mechanismy, podobné těm, které se aktivují u buněk reagujících na LPS. Interakce a regulační role těchto kináz v signálních drahách poukazují na komplexní vnitrobuněčné mechanismy, což naznačuje, že dráhy PKC a tyrozinkinázy by mohly kompenzovat defektní signalizaci LPS. Toto pozorování otevírá možnosti pro zkoumání toho, jak fosforylace modulovaná tyrozinkinázami ovlivňuje celkové buněčné odpovědi u těchto myší.
Pokračování výzkumu buněk FS-C3H je zásadní pro pochopení molekulárního základu jejich hyporesponzivity na LPS, která potenciálně souvisí s genetickým defektem v genu Lpsn. Prozkoumáním fosforylačních profilů těchto buněk ve srovnání s buňkami, které reagují na LPS, chtějí vědci odhalit specifické molekulární defekty, které vedou ke změněné aktivaci genů a proliferační odpovědi. Izolace a charakterizace genového produktu zodpovědného za interakci s LPS by mohla poskytnout hlubší vhled do dysfunkcí imunitního systému a připravit půdu pro nové terapeutické přístupy v léčbě souvisejících imunitních a zánětlivých poruch.
- Tkáň
- Kůže
- Nemoc
- Fibrosarkom
02Klasifikace
- Organismus
- Myš
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Identifikátory
- Citace
- FS-C3H (katalogové číslo Cytion 400418)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5755
04Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Hustota výsevu
- 2 x 104 buněk/cm2
- Obnova tekutin
- 2 až 3krát týdně
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
06Dárce
- Plemeno / poddruh
- C3H
07Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Prohlášení o vyloučení odpovědnosti
- Naše buňky jsou poskytovány výhradně pro účely laboratorního výzkumu in vitro a nejsou určeny pro klinické nebo diagnostické použití, ani nejsou určeny k podávání lidem nebo použití pro veterinární účely. Uživatelé musí dodržovat všechny platné pokyny a předpisy pro zacházení s těmito buňkami a jejich použití ve výzkumném prostředí.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano
.jpg)