Přejít na obsah
FS-C3H
Tkáň
Kůže
Nemoc
Fibrosarkom

Dokumenty

FS-C3H

Cell line · Číslo výrobku 400418

The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...

€800.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie FS-C3H, odvozená z myšího kmene C3H/HeJ, hraje klíčovou roli při studiu reakcí hostitele na endotoxiny, zejména v kontextu výzkumu rakoviny. Tento kmen se vyznačuje odolností vůči endotoxinu díky specifické necitlivosti na lipopolysacharid (LPS), hlavní složku bakteriálního endotoxinu. Díky této vlastnosti se FS-C3H stal neocenitelným modelem pro zkoumání biochemických a genetických drah zapojených do regulace imunitní odpovědi. Výzkumníci tuto buněčnou linii hojně využívali ke zkoumání dynamiky B lymfocytů a makrofágů se zaměřením na jejich jedinečnou nereaktivitu na LPS, která kontrastuje s typickými reakcemi imunitních buněk na takové podněty.

Nereaktivita buněk FS-C3H na LPS se přisuzuje absenci nebo změně klíčového receptoru zodpovědného za přenos signálu LPS. Studie ukázaly, že navzdory nereaktivitě na LPS mohou být tyto buňky aktivovány alternativními cestami, jako jsou proteinkináza C (PKC) a tyrozinkinázové signální mechanismy, podobné těm, které se aktivují u buněk reagujících na LPS. Interakce a regulační role těchto kináz v signálních drahách poukazují na komplexní vnitrobuněčné mechanismy, což naznačuje, že dráhy PKC a tyrozinkinázy by mohly kompenzovat defektní signalizaci LPS. Toto pozorování otevírá možnosti pro zkoumání toho, jak fosforylace modulovaná tyrozinkinázami ovlivňuje celkové buněčné odpovědi u těchto myší.

Pokračování výzkumu buněk FS-C3H je zásadní pro pochopení molekulárního základu jejich hyporesponzivity na LPS, která potenciálně souvisí s genetickým defektem v genu Lpsn. Prozkoumáním fosforylačních profilů těchto buněk ve srovnání s buňkami, které reagují na LPS, chtějí vědci odhalit specifické molekulární defekty, které vedou ke změněné aktivaci genů a proliferační odpovědi. Izolace a charakterizace genového produktu zodpovědného za interakci s LPS by mohla poskytnout hlubší vhled do dysfunkcí imunitního systému a připravit půdu pro nové terapeutické přístupy v léčbě souvisejících imunitních a zánětlivých poruch.

Tkáň
Kůže
Nemoc
Fibrosarkom

02Klasifikace

Organismus
Myš
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Identifikátory

Citace
FS-C3H (katalogové číslo Cytion 400418)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5755

04Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

06Dárce

Plemeno / poddruh
C3H