Skip to content
FS-C3H
Tissue
עור
Disease
פיברוסרקומה

Documents

FS-C3H

Cell line · Product number 400418

The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

קו התאים FS-C3H, שמקורו בזן העכברים C3H/HeJ, ממלא תפקיד מרכזי בחקר תגובות המארח לאנדוטוקסינים, במיוחד בהקשר של מחקר הסרטן. זן זה בולט בעמידותו לאנדוטוקסינים בשל חוסר רגישות ספציפי לליפופוליסכריד (LPS), מרכיב עיקרי באנדוטוקסינים חיידקיים. מאפיין זה הפך את FS-C3H למודל יקר ערך לניתוח המסלולים הביוכימיים והגנטיים המעורבים בוויסות התגובה החיסונית. חוקרים השתמשו בקו תאים זה באופן נרחב כדי לבחון את הדינמיקה של לימפוציטים B ומקרופאגים, תוך התמקדות בחוסר התגובה הייחודי שלהם ל-LPS, המנוגד לתגובות הטיפוסיות של תאי חיסון לגירויים מסוג זה.

חוסר התגובה של תאי FS-C3H ל-LPS מיוחס להיעדרות או לשינוי של קולטן חיוני האחראי להעברת אותות LPS. מחקרים הראו כי למרות חוסר התגובה ל-LPS, תאים אלה יכולים להיות מופעלים באמצעות מסלולים חלופיים כגון מנגנוני איתות של חלבון קינאז C (PKC) וטירוזין קינאז, הדומים לאלה המופעלים בתאים המגיבים ל-LPS. האינטראקציה והתפקידים הרגולטוריים של קינאזות אלה במסלולי האיתות מדגישים מנגנונים תאיים מורכבים, ומרמזים כי מסלולי PKC וטירוזין קינאז עשויים לפצות על איתות LPS הפגום. תצפית זו פותחת דרכים לחקר האופן שבו זרחון המווסת על ידי טירוזין קינאז משפיע על התגובות התאיות הכוללות בעכברים אלה.

מחקר מתמשך על תאי FS-C3H הוא קריטי להבנת הבסיס המולקולרי של תגובתם המוגבלת ל-LPS, הקשורה ככל הנראה לפגם גנטי בגן Lpsn. באמצעות בחינה מעמיקה של פרופילי הזרחון של תאים אלה בהשוואה לתאים המגיבים ל-LPS, מדענים שואפים לפענח את הפגמים המולקולריים הספציפיים המובילים לשינויים בהפעלת גנים ובתגובות התרבות. בידוד ואפיון של תוצר הגן האחראי לאינטראקציה עם LPS עשויים לספק תובנות מעמיקות יותר על תפקוד לקוי של מערכת החיסון ולסלול את הדרך לגישות טיפוליות חדשות בטיפול בהפרעות חיסוניות ודלקתיות קשורות.

Tissue
עור
Disease
פיברוסרקומה

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
FS-C3H (מספר קטלוגי Cytion 400418)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5755

04Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
2 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

06Donor

Breed / subspecies
C3H