FS-C3H
Cell line · Toote number 400418
The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...
Kohandamine / Soovitused
- FS-C3HCell line€800.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
FS-C3H rakuliin, mis on saadud C3H/HeJ hiiretüvest, mängib olulist rolli peremeesorganismi vastuste uurimisel endotoksiinidele, eriti vähiuuringute kontekstis. See tüvi on märkimisväärne oma resistentsuse poolest endotoksiini suhtes, mis tuleneb spetsiifilisest tundmatusest lipopolüsahhariidi (LPS) suhtes, mis on bakteriaalse endotoksiini peamine komponent. See omadus on teinud FS-C3H-st hindamatu väärtusega mudeli immuunvastuse regulatsioonis osalevate biokeemiliste ja geneetiliste radade uurimiseks. Teadlased on seda rakuliini ulatuslikult kasutanud B-lümfotsüütide ja makrofaagide dünaamika uurimiseks, keskendudes nende ainulaadsele mittetundlikkusele LPS-le, mis on vastuolus tüüpiliste immuunraku reaktsioonidega sellistele stiimulitele.
FS-C3H rakkude mittereaktsioonilisus LPSile on tingitud LPSi signaaliülekande eest vastutava olulise retseptori puudumisest või muutumisest. Uuringud on näidanud, et hoolimata LPSi suhtes mittereaktiivsusest võivad need rakud aktiveeruda alternatiivsete radade, näiteks proteiinkinaas C (PKC) ja türosiinkinaasi signaalimehhanismide kaudu, mis on sarnased LPSile reageerivate rakkude aktiveeritud mehhanismidega. Nende kinaaside koostoime ja regulatiivne roll signaaliradadel toob esile keerulised rakusisesed mehhanismid, mis viitavad sellele, et PKC ja türosiinkinaasi radad võivad kompenseerida defektset LPS-signalisatsiooni. See tähelepanek avab võimalusi uurida, kuidas türosiini kinaasi moduleeritud fosforüülimine mõjutab nende hiirte üldist rakuvastust.
FS-C3H rakkude jätkuv uurimine on kriitilise tähtsusega, et mõista nende hüpoorsuse molekulaarset alust LPSile, mis võib olla seotud geneetilise defektiga Lpsn geenis. Uurides nende rakkude fosforüleerimisprofiile võrreldes LPS-reageerijatega, püüavad teadlased välja selgitada spetsiifilised molekulaarsed defektid, mis põhjustavad geenide muutunud aktiveerimise ja proliferatsioonivastuse. LPS-i koostoime eest vastutava geenitoote isoleerimine ja iseloomustamine võib anda sügavamaid teadmisi immuunsüsteemi talitlushäiretest ja sillutada teed uutele terapeutilistele lähenemisviisidele seotud immuun- ja põletikuhäirete ravimisel.
- Kude
- Nahk
- Haigus
- Fibrosarkoom
02Klassifikatsioon
- Organism
- Hiir
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Tunnused
- Viide
- FS-C3H (Cytioni katalooginumber 400418)
- NCBI maksukood
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5755
04Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Külvitihedus
- 2 x 104 rakku/cm2
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
06Annetaja
- Tõug / alamliik
- C3H
07Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Vastutuse välistamine
- Meie rakud on ette nähtud üksnes in vitro laboratoorseks uurimistööks ning need ei ole mõeldud kliiniliseks või diagnostiliseks kasutamiseks, samuti ei tohi neid manustada inimestele ega kasutada veterinaarsetel eesmärkidel. Kasutajad peavad järgima kõiki kohaldatavaid suuniseid ja eeskirju nende rakkude käitlemise ja kasutamise kohta teadusuuringutes.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah
.jpg)