Mine otse sisu juurde
FS-C3H
Kude
Nahk
Haigus
Fibrosarkoom

Dokumendid

FS-C3H

Cell line · Toote number 400418

The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

FS-C3H rakuliin, mis on saadud C3H/HeJ hiiretüvest, mängib olulist rolli peremeesorganismi vastuste uurimisel endotoksiinidele, eriti vähiuuringute kontekstis. See tüvi on märkimisväärne oma resistentsuse poolest endotoksiini suhtes, mis tuleneb spetsiifilisest tundmatusest lipopolüsahhariidi (LPS) suhtes, mis on bakteriaalse endotoksiini peamine komponent. See omadus on teinud FS-C3H-st hindamatu väärtusega mudeli immuunvastuse regulatsioonis osalevate biokeemiliste ja geneetiliste radade uurimiseks. Teadlased on seda rakuliini ulatuslikult kasutanud B-lümfotsüütide ja makrofaagide dünaamika uurimiseks, keskendudes nende ainulaadsele mittetundlikkusele LPS-le, mis on vastuolus tüüpiliste immuunraku reaktsioonidega sellistele stiimulitele.

FS-C3H rakkude mittereaktsioonilisus LPSile on tingitud LPSi signaaliülekande eest vastutava olulise retseptori puudumisest või muutumisest. Uuringud on näidanud, et hoolimata LPSi suhtes mittereaktiivsusest võivad need rakud aktiveeruda alternatiivsete radade, näiteks proteiinkinaas C (PKC) ja türosiinkinaasi signaalimehhanismide kaudu, mis on sarnased LPSile reageerivate rakkude aktiveeritud mehhanismidega. Nende kinaaside koostoime ja regulatiivne roll signaaliradadel toob esile keerulised rakusisesed mehhanismid, mis viitavad sellele, et PKC ja türosiinkinaasi radad võivad kompenseerida defektset LPS-signalisatsiooni. See tähelepanek avab võimalusi uurida, kuidas türosiini kinaasi moduleeritud fosforüülimine mõjutab nende hiirte üldist rakuvastust.

FS-C3H rakkude jätkuv uurimine on kriitilise tähtsusega, et mõista nende hüpoorsuse molekulaarset alust LPSile, mis võib olla seotud geneetilise defektiga Lpsn geenis. Uurides nende rakkude fosforüleerimisprofiile võrreldes LPS-reageerijatega, püüavad teadlased välja selgitada spetsiifilised molekulaarsed defektid, mis põhjustavad geenide muutunud aktiveerimise ja proliferatsioonivastuse. LPS-i koostoime eest vastutava geenitoote isoleerimine ja iseloomustamine võib anda sügavamaid teadmisi immuunsüsteemi talitlushäiretest ja sillutada teed uutele terapeutilistele lähenemisviisidele seotud immuun- ja põletikuhäirete ravimisel.

Kude
Nahk
Haigus
Fibrosarkoom

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
FS-C3H (Cytioni katalooginumber 400418)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_5755

04Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

06Annetaja

Tõug / alamliik
C3H