Μετάβαση στο περιεχόμενο
FS-C3H
Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Ινοσάρκωμα

Έγγραφα

FS-C3H

Cell line · Αριθμός προϊόντος 400418

The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά FS-C3H, που προέρχεται από το στέλεχος ποντικών C3H/HeJ, διαδραματίζει καθοριστικό ρόλο στη μελέτη των αποκρίσεων του ξενιστή στις ενδοτοξίνες, ιδίως στο πλαίσιο της έρευνας για τον καρκίνο. Το στέλεχος αυτό είναι αξιοσημείωτο για την αντοχή του στην ενδοτοξίνη λόγω ειδικής αναισθησίας στον λιποπολυσακχαρίτη (LPS), κύριο συστατικό της βακτηριακής ενδοτοξίνης. Αυτό το χαρακτηριστικό έχει καταστήσει το FS-C3H ένα ανεκτίμητο μοντέλο για την ανάλυση των βιοχημικών και γενετικών μονοπατιών που εμπλέκονται στη ρύθμιση της ανοσολογικής απόκρισης. Οι ερευνητές έχουν χρησιμοποιήσει εκτενώς αυτή την κυτταρική σειρά για να εξετάσουν τη δυναμική των Β λεμφοκυττάρων και των μακροφάγων, εστιάζοντας στη μοναδική μη-ανταπόκρισή τους στον LPS, η οποία έρχεται σε αντίθεση με τις τυπικές αντιδράσεις των κυττάρων του ανοσοποιητικού συστήματος σε τέτοια ερεθίσματα.

Η μη ανταπόκριση των κυττάρων FS-C3H στον LPS αποδίδεται στην απουσία ή στην αλλοίωση ενός κρίσιμου υποδοχέα που είναι υπεύθυνος για τη μεταγωγή σήματος του LPS. Μελέτες έχουν δείξει ότι, παρά τη μη αντίδραση στον LPS, τα κύτταρα αυτά μπορούν να ενεργοποιηθούν μέσω εναλλακτικών οδών, όπως οι μηχανισμοί σηματοδότησης της πρωτεϊνικής κινάσης C (PKC) και της κινάσης τυροσίνης, παρόμοιοι με εκείνους που ενεργοποιούνται στα κύτταρα που ανταποκρίνονται στον LPS. Η αλληλεπίδραση και οι ρυθμιστικοί ρόλοι αυτών των κινασών στα μονοπάτια σηματοδότησης αναδεικνύουν πολύπλοκους ενδοκυτταρικούς μηχανισμούς, γεγονός που υποδηλώνει ότι τα μονοπάτια της PKC και της κινάσης τυροσίνης θα μπορούσαν να αντισταθμίσουν την ελαττωματική σηματοδότηση του LPS. Η παρατήρηση αυτή ανοίγει δρόμους για τη διερεύνηση του τρόπου με τον οποίο η φωσφορυλίωση που ρυθμίζεται από κινάσες τυροσίνης επηρεάζει τις συνολικές κυτταρικές αποκρίσεις σε αυτά τα ποντίκια.

Η συνέχιση της έρευνας στα κύτταρα FS-C3H είναι ζωτικής σημασίας για την κατανόηση της μοριακής βάσης της υποανταπόκρισής τους στον LPS, που ενδεχομένως συνδέεται με γενετικό ελάττωμα στο γονίδιο Lpsn. Εμβαθύνοντας στα προφίλ φωσφορυλίωσης αυτών των κυττάρων σε σύγκριση με τα κύτταρα που ανταποκρίνονται στο LPS, οι επιστήμονες στοχεύουν να διαλευκάνουν τις συγκεκριμένες μοριακές ατέλειες που οδηγούν σε τροποποιημένες αποκρίσεις γονιδιακής ενεργοποίησης και πολλαπλασιασμού. Η απομόνωση και ο χαρακτηρισμός του γονιδιακού προϊόντος που είναι υπεύθυνο για την αλληλεπίδραση με το LPS θα μπορούσε να προσφέρει βαθύτερη γνώση των δυσλειτουργιών του ανοσοποιητικού συστήματος και να ανοίξει το δρόμο για νέες θεραπευτικές προσεγγίσεις στη θεραπεία σχετικών ανοσολογικών και φλεγμονωδών διαταραχών.

Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Ινοσάρκωμα

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Αναγνωριστικά

Παραπομπή
FS-C3H (αριθμός καταλόγου Cytion 400418)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_5755

04Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
2 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

06Δωρητής

Φυλή / υποείδος
C3H