FS-C3H
Cell line · Numer produktu 400418
The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...
Dostosowanie / Zalecenia
- FS-C3HCell line€800.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Linia komórkowa FS-C3H, wywodząca się ze szczepu myszy C3H/HeJ, odgrywa kluczową rolę w badaniu odpowiedzi gospodarza na endotoksyny, szczególnie w kontekście badań nad rakiem. Szczep ten wyróżnia się odpornością na endotoksyny ze względu na specyficzną niewrażliwość na lipopolisacharyd (LPS), główny składnik endotoksyny bakteryjnej. Cecha ta sprawiła, że FS-C3H stał się nieocenionym modelem do badania biochemicznych i genetycznych szlaków zaangażowanych w regulację odpowiedzi immunologicznej. Naukowcy szeroko wykorzystywali tę linię komórkową do badania dynamiki limfocytów B i makrofagów, koncentrując się na ich unikalnej braku odpowiedzi na LPS, co kontrastuje z typowymi reakcjami komórek odpornościowych na takie bodźce.
Brak odpowiedzi komórek FS-C3H na LPS przypisuje się brakowi lub zmianie kluczowego receptora odpowiedzialnego za transdukcję sygnału LPS. Badania wykazały, że pomimo braku reakcji na LPS, komórki te mogą być aktywowane poprzez alternatywne szlaki, takie jak kinaza białkowa C (PKC) i mechanizmy sygnalizacyjne kinazy tyrozynowej, podobne do tych aktywowanych w komórkach reagujących na LPS. Interakcje i role regulacyjne tych kinaz w szlakach sygnałowych podkreślają złożone mechanizmy wewnątrzkomórkowe, sugerując, że szlaki PKC i kinazy tyrozynowej mogą kompensować wadliwą sygnalizację LPS. Ta obserwacja otwiera drogę do zbadania, w jaki sposób fosforylacja modulowana przez kinazy tyrozynowe wpływa na ogólną odpowiedź komórkową u tych myszy.
Dalsze badania nad komórkami FS-C3H mają kluczowe znaczenie dla zrozumienia molekularnych podstaw ich hiporesponsywności na LPS, potencjalnie związanej z defektem genetycznym genu Lpsn. Zagłębiając się w profile fosforylacji tych komórek w porównaniu z komórkami reagującymi na LPS, naukowcy dążą do odkrycia specyficznych defektów molekularnych, które prowadzą do zmienionej aktywacji genów i odpowiedzi proliferacyjnych. Wyizolowanie i scharakteryzowanie produktu genowego odpowiedzialnego za interakcję z LPS może zapewnić głębszy wgląd w dysfunkcje układu odpornościowego i utorować drogę do nowych podejść terapeutycznych w leczeniu powiązanych zaburzeń immunologicznych i zapalnych.
- Chusteczka
- Skóra
- Choroba
- Włókniakomięsak
02Klasyfikacja
- Organizm
- Mysz
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Identyfikatory
- Źródło
- FS-C3H (numer katalogowy Cytion 400418)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5755
04Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Gęstość wysiewu
- 2 x 104 komórek/cm2
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
06Darczyńca
- Rasa / podgatunek
- C3H
07Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Zastrzeżenie
- Nasze komórki są dostarczane wyłącznie do celów badań laboratoryjnych in vitro i nie są przeznaczone do użytku klinicznego lub diagnostycznego, nie mogą być podawane ludziom ani wykorzystywane do celów weterynaryjnych. Użytkownicy muszą przestrzegać wszystkich obowiązujących wytycznych i przepisów dotyczących obchodzenia się z tymi komórkami i korzystania z nich w środowisku badawczym.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak
.jpg)