Przejdź do treści
FS-C3H
Chusteczka
Skóra
Choroba
Włókniakomięsak

Dokumenty

FS-C3H

Cell line · Numer produktu 400418

The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa FS-C3H, wywodząca się ze szczepu myszy C3H/HeJ, odgrywa kluczową rolę w badaniu odpowiedzi gospodarza na endotoksyny, szczególnie w kontekście badań nad rakiem. Szczep ten wyróżnia się odpornością na endotoksyny ze względu na specyficzną niewrażliwość na lipopolisacharyd (LPS), główny składnik endotoksyny bakteryjnej. Cecha ta sprawiła, że FS-C3H stał się nieocenionym modelem do badania biochemicznych i genetycznych szlaków zaangażowanych w regulację odpowiedzi immunologicznej. Naukowcy szeroko wykorzystywali tę linię komórkową do badania dynamiki limfocytów B i makrofagów, koncentrując się na ich unikalnej braku odpowiedzi na LPS, co kontrastuje z typowymi reakcjami komórek odpornościowych na takie bodźce.

Brak odpowiedzi komórek FS-C3H na LPS przypisuje się brakowi lub zmianie kluczowego receptora odpowiedzialnego za transdukcję sygnału LPS. Badania wykazały, że pomimo braku reakcji na LPS, komórki te mogą być aktywowane poprzez alternatywne szlaki, takie jak kinaza białkowa C (PKC) i mechanizmy sygnalizacyjne kinazy tyrozynowej, podobne do tych aktywowanych w komórkach reagujących na LPS. Interakcje i role regulacyjne tych kinaz w szlakach sygnałowych podkreślają złożone mechanizmy wewnątrzkomórkowe, sugerując, że szlaki PKC i kinazy tyrozynowej mogą kompensować wadliwą sygnalizację LPS. Ta obserwacja otwiera drogę do zbadania, w jaki sposób fosforylacja modulowana przez kinazy tyrozynowe wpływa na ogólną odpowiedź komórkową u tych myszy.

Dalsze badania nad komórkami FS-C3H mają kluczowe znaczenie dla zrozumienia molekularnych podstaw ich hiporesponsywności na LPS, potencjalnie związanej z defektem genetycznym genu Lpsn. Zagłębiając się w profile fosforylacji tych komórek w porównaniu z komórkami reagującymi na LPS, naukowcy dążą do odkrycia specyficznych defektów molekularnych, które prowadzą do zmienionej aktywacji genów i odpowiedzi proliferacyjnych. Wyizolowanie i scharakteryzowanie produktu genowego odpowiedzialnego za interakcję z LPS może zapewnić głębszy wgląd w dysfunkcje układu odpornościowego i utorować drogę do nowych podejść terapeutycznych w leczeniu powiązanych zaburzeń immunologicznych i zapalnych.

Chusteczka
Skóra
Choroba
Włókniakomięsak

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Identyfikatory

Źródło
FS-C3H (numer katalogowy Cytion 400418)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5755

04Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
2 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

06Darczyńca

Rasa / podgatunek
C3H