İçeriğe atla
FS-C3H
Doku
Cilt
Hastalık
Fibrosarkom

FS-C3H

Cell line · Ürün numarası 400418

The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...

€800.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama

C3H/HeJ fare türünden türetilen FS-C3H hücre hattı, özellikle kanser araştırmaları bağlamında endotoksinlere karşı konak tepkilerinin incelenmesinde önemli bir rol oynamaktadır. Bu tür, bakteriyel endotoksinin ana bileşeni olan lipopolisakkaride (LPS) karşı spesifik bir duyarsızlık nedeniyle endotoksine karşı direnci ile dikkat çekmektedir. Bu özellik FS-C3H'yi bağışıklık yanıtının düzenlenmesinde rol oynayan biyokimyasal ve genetik yolların incelenmesi için paha biçilmez bir model haline getirmiştir. Araştırmacılar, B lenfositleri ve makrofajların dinamiklerini incelemek için bu hücre hattını kapsamlı bir şekilde kullanmış ve bu tür uyaranlara karşı tipik bağışıklık hücresi tepkileriyle tezat oluşturan LPS'ye karşı benzersiz tepkisizliklerine odaklanmışlardır.

FS-C3H hücrelerinin LPS'ye yanıt vermemesi, LPS sinyal iletiminden sorumlu önemli bir reseptörün yokluğuna veya değişmesine bağlanmaktadır. Çalışmalar, LPS'ye tepkisizliğe rağmen, bu hücrelerin LPS'ye yanıt veren hücrelerde aktive edilenlere benzer şekilde protein kinaz C (PKC) ve tirozin kinaz sinyal mekanizmaları gibi alternatif yollarla aktive edilebileceğini göstermiştir. Bu kinazların sinyal yollarındaki etkileşimi ve düzenleyici rolleri, karmaşık hücre içi mekanizmaları vurgulamakta ve PKC ve tirozin kinaz yollarının kusurlu LPS sinyalini telafi edebileceğini düşündürmektedir. Bu gözlem, tirozin kinaz modülasyonlu fosforilasyonun bu farelerde genel hücresel tepkileri nasıl etkilediğini araştırmak için yollar açmaktadır.

FS-C3H hücreleri üzerinde devam eden araştırmalar, potansiyel olarak Lpsn genindeki genetik bir kusurla bağlantılı olan LPS'ye karşı aşırı duyarlılıklarının moleküler temelini anlamak için kritik öneme sahiptir. Bilim insanları, LPS'ye yanıt verenlerle karşılaştırıldığında bu hücrelerin fosforilasyon profillerini inceleyerek, değişen gen aktivasyonu ve proliferasyon yanıtlarına yol açan spesifik moleküler kusurları çözmeyi amaçlıyor. LPS etkileşiminden sorumlu gen ürününün izolasyonu ve karakterizasyonu, bağışıklık sistemi işlev bozuklukları hakkında daha derin bilgiler sağlayabilir ve ilgili bağışıklık ve enflamatuar bozuklukların tedavisinde yeni terapötik yaklaşımların önünü açabilir.

Doku
Cilt
Hastalık
Fibrosarkom

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
FS-C3H (Cytion katalog numarası 400418)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_5755

04İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
2 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

06Bağışçı

Tür / alt tür
C3H