Prejsť na obsah
FS-C3H
Tkanivo
Koža
Choroba
Fibrosarkóm

Dokumenty

FS-C3H

Cell line · Číslo výrobku 400418

The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...

€800.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia FS-C3H, odvodená od kmeňa myší C3H/HeJ, zohráva kľúčovú úlohu pri štúdiu reakcií hostiteľa na endotoxíny, najmä v kontexte výskumu rakoviny. Tento kmeň sa vyznačuje odolnosťou voči endotoxínu v dôsledku špecifickej necitlivosti na lipopolysacharid (LPS), hlavnú zložku bakteriálneho endotoxínu. Vďaka tejto vlastnosti sa FS-C3H stal neoceniteľným modelom na rozbor biochemických a genetických dráh zapojených do regulácie imunitnej odpovede. Výskumníci vo veľkej miere využívali túto bunkovú líniu na skúmanie dynamiky B lymfocytov a makrofágov so zameraním na ich jedinečnú nereaktivitu na LPS, ktorá je v kontraste s typickými reakciami imunitných buniek na takéto podnety.

Nereagovanie buniek FS-C3H na LPS sa pripisuje absencii alebo zmene kľúčového receptora zodpovedného za prenos signálu LPS. Štúdie ukázali, že napriek nereaktivite na LPS sa tieto bunky môžu aktivovať alternatívnymi cestami, ako sú mechanizmy signalizácie proteínkinázy C (PKC) a tyrozínkinázy, podobné tým, ktoré sa aktivujú v bunkách reagujúcich na LPS. Interakcia a regulačné úlohy týchto kináz v signálnych dráhach poukazujú na komplexné vnútrobunkové mechanizmy, čo naznačuje, že PKC a tyrozínkinázové dráhy by mohli kompenzovať defektnú signalizáciu LPS. Toto pozorovanie otvára možnosti na skúmanie toho, ako fosforylácia modulovaná tyrozínkinázou ovplyvňuje celkové bunkové reakcie u týchto myší.

Pokračovanie výskumu buniek FS-C3H je rozhodujúce pre pochopenie molekulárneho základu ich hyporesponzivity na LPS, ktorá potenciálne súvisí s genetickým defektom génu Lpsn. Skúmaním fosforylačných profilov týchto buniek v porovnaní s bunkami reagujúcimi na LPS sa vedci snažia odhaliť špecifické molekulárne defekty, ktoré vedú k zmenenej aktivácii génov a proliferačnej odpovedi. Izolácia a charakterizácia génového produktu zodpovedného za interakciu s LPS by mohla poskytnúť hlbší pohľad na dysfunkcie imunitného systému a pripraviť pôdu pre nové terapeutické prístupy pri liečbe súvisiacich imunitných a zápalových porúch.

Tkanivo
Koža
Choroba
Fibrosarkóm

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Identifikátory

Citácia
FS-C3H (katalógové číslo Cytion 400418)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5755

04Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

06Darca

Plemeno / poddruh
C3H