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FS-C3H
Cell line · Product number 400418
The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...
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01General information
- Description
源自 C3H/HeJ 小鼠品系的 FS-C3H 細胞系，在研究宿主對內毒素的反應方面扮演著關鍵角色，特別是在癌症研究的背景下。 該品系因對脂多醣（LPS）——細菌內毒素的主要成分——具有特定的不敏感性，因而以其對內毒素的耐受性而著稱。此特性使 FS-C3H 成為解析免疫反應調控相關生化與遺傳途徑的無價模型。 研究人員廣泛利用此細胞系來探討 B 淋巴細胞和巨噬細胞的動態變化，重點在於其對 LPS 的獨特無反應性，這與典型免疫細胞對此類刺激的反應形成鮮明對比。
FS-C3H 細胞對 LPS 無反應的現象，歸因於負責 LPS 訊號傳導的關鍵受體缺失或發生變異。 研究顯示，儘管對 LPS 無反應，這些細胞仍可透過蛋白激酶 C（PKC）和酪胺酸激酶訊號傳導機制等替代途徑被活化，其活化機制與 LPS 反應性細胞中的機制相似。 這些激酶在訊號傳導路徑中的相互作用與調控作用，凸顯了複雜的細胞內機制，暗示 PKC 和酪胺酸激酶路徑可能彌補了 LPS 訊號傳導的缺陷。這項觀察為探索酪胺酸激酶調控的磷酸化如何影響這些小鼠的整體細胞反應，開闢了新途徑。
持續針對 FS-C3H 細胞進行研究，對於理解其對 LPS 反應遲鈍的分子基礎至關重要，這可能與 Lpsn 基因的遺傳缺陷有關。透過深入探討這些細胞與 LPS 反應細胞相比的磷酸化特徵，科學家旨在釐清導致基因活化及增殖反應改變的具體分子缺陷。 分離並闡明負責與 LPS 相互作用的基因產物，將有助於更深入地了解免疫系統功能失調，並為治療相關免疫及發炎性疾病開闢嶄新的治療途徑。
- Tissue
- 皮膚
- Disease
- 纖維肉瘤
02Classification
- Organism
- Mouse
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Identifiers
- Citation
- FS-C3H（Cytion 型號 400418）
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5755
04Handling and culture
- Culture medium
- DMEM，含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉（Cytion 產品編號 820300a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 2 × 10⁴ 個細胞/cm²
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
06Donor
- Breed / subspecies
- C3H
07Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Disclaimer
- 本產品所提供的細胞僅供體外實驗室研究之用，不得用於臨床或診斷用途，亦不得施予人類或用於獸醫用途。使用者必須遵守所有適用於研究環境中處理及使用這些細胞的相關指引與法規。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes