Gå til innholdet
FS-C3H
Vev
Hud
Sykdom
Fibrosarkom

Dokumenter

FS-C3H

Cell line · Produktnummer 400418

The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...

€800.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

FS-C3H-cellelinjen, som stammer fra C3H/HeJ-musestammen, spiller en sentral rolle i studier av vertsresponser på endotoksiner, særlig i forbindelse med kreftforskning. Denne stammen er kjent for sin motstandskraft mot endotoksin på grunn av en spesifikk ufølsomhet overfor lipopolysakkarid (LPS), en hovedkomponent i bakteriell endotoksin. Denne egenskapen har gjort FS-C3H til en uvurderlig modell for dissekering av de biokjemiske og genetiske veiene som er involvert i reguleringen av immunresponsen. Forskere har brukt denne cellelinjen til å undersøke dynamikken i B-lymfocytter og makrofager, med fokus på deres unike manglende respons på LPS, noe som står i kontrast til typiske immuncellereaksjoner på slike stimuli.

FS-C3H-cellenes manglende respons på LPS tilskrives fravær eller endring av en viktig reseptor som er ansvarlig for LPS-signaltransduksjon. Studier har vist at til tross for at disse cellene ikke reagerer på LPS, kan de aktiveres gjennom alternative signalveier som proteinkinase C (PKC) og tyrosinkinase-signalmekanismer, som ligner de som aktiveres i LPS-responsive celler. Samspillet mellom disse kinasene og deres regulerende roller i signalveiene belyser komplekse intracellulære mekanismer, noe som tyder på at PKC- og tyrosinkinaseveiene kan kompensere for den mangelfulle LPS-signaleringen. Denne observasjonen åpner for å utforske hvordan tyrosinkinase-modulert fosforylering påvirker den generelle cellulære responsen hos disse musene.

Fortsatt forskning på FS-C3H-celler er avgjørende for å forstå det molekylære grunnlaget for deres hyporesponsivitet mot LPS, som kan være knyttet til en genetisk defekt i Lpsn-genet. Ved å se nærmere på fosforyleringsprofilene til disse cellene sammenlignet med celler som responderer på LPS, tar forskerne sikte på å avdekke de spesifikke molekylære defektene som fører til endret genaktivering og proliferasjonsrespons. Isolering og karakterisering av genproduktet som er ansvarlig for LPS-interaksjonen, kan gi dypere innsikt i dysfunksjoner i immunsystemet og bane vei for nye terapeutiske tilnærminger til behandling av relaterte immun- og betennelsessykdommer.

Vev
Hud
Sykdom
Fibrosarkom

02Klassifisering

Organisme
Mus
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Identifikatorer

Kildehenvisning
FS-C3H (Cytion-katalognummer 400418)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5755

04Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
2 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

06Donor

Rase / underart
C3H