Gå direkte til indholdet
FS-C3H
Væv
Hud
Sygdom
Fibrosarkom

Dokumenter

FS-C3H

Cell line · Varenummer 400418

The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...

€800.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

FS-C3H-cellelinjen, der stammer fra C3H/HeJ-musestammen, spiller en central rolle i studiet af værtsreaktioner på endotoksiner, især i forbindelse med kræftforskning. Denne stamme er bemærkelsesværdig for sin modstandsdygtighed over for endotoksin på grund af en specifik ufølsomhed over for lipopolysakkarid (LPS), en hovedkomponent i bakteriel endotoksin. Denne egenskab har gjort FS-C3H til en uvurderlig model til dissekering af de biokemiske og genetiske veje, der er involveret i reguleringen af immunresponsen. Forskere har i vid udstrækning brugt denne cellelinje til at undersøge dynamikken i B-lymfocytter og makrofager med fokus på deres unikke manglende reaktion på LPS, som står i kontrast til typiske immuncelle-reaktioner på sådanne stimuli.

FS-C3H-cellernes manglende reaktion på LPS tilskrives fraværet eller ændringen af en afgørende receptor, der er ansvarlig for LPS-signaltransduktion. Undersøgelser har vist, at på trods af den manglende reaktion på LPS kan disse celler aktiveres via alternative veje, såsom proteinkinase C (PKC) og tyrosinkinase-signaleringsmekanismer, der ligner dem, der aktiveres i LPS-responsive celler. Disse kinasers interaktion og regulerende roller i signalveje fremhæver komplekse intracellulære mekanismer, hvilket tyder på, at PKC- og tyrosinkinasevejene kan kompensere for den defekte LPS-signalering. Denne observation åbner muligheder for at udforske, hvordan tyrosinkinase-moduleret fosforylering påvirker den samlede cellulære respons i disse mus.

Fortsat forskning i FS-C3H-celler er afgørende for at forstå det molekylære grundlag for deres hyporesponsivitet over for LPS, som potentielt er forbundet med en genetisk defekt i Lpsn-genet. Ved at dykke ned i disse cellers fosforyleringsprofiler sammenlignet med LPS-responderende celler vil forskerne forsøge at afdække de specifikke molekylære defekter, der fører til ændret genaktivering og proliferationsrespons. Isolering og karakterisering af det genprodukt, der er ansvarligt for LPS-interaktion, kan give dybere indsigt i immunsystemets dysfunktioner og bane vejen for nye terapeutiske tilgange til behandling af relaterede immun- og inflammatoriske lidelser.

Væv
Hud
Sygdom
Fibrosarkom

02Klassificering

Organisme
Mus
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Identifikatorer

Kildehenvisning
FS-C3H (Cytion katalognummer 400418)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5755

04Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
2 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

06Donor

Race / underart
C3H