FS-C3H
Cell line · Prekės numeris 400418
The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- FS-C3HCell line€800.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
FS-C3H ląstelių linija, gauta iš C3H/HeJ pelių padermės, atlieka svarbų vaidmenį tiriant šeimininko reakciją į endotoksinus, ypač vėžio tyrimų kontekste. Ši padermė išsiskiria atsparumu endotoksinui dėl specifinio nejautrumo lipopolisacharidui (LPS), pagrindiniam bakterijų endotoksino komponentui. Dėl šios savybės FS-C3H tapo neįkainojamu modeliu biocheminiams ir genetiniams imuninio atsako reguliavimo keliams tirti. Mokslininkai plačiai naudojo šią ląstelių liniją B limfocitų ir makrofagų dinamikai tirti, daugiausia dėmesio skirdami unikaliam jų nereagavimui į LPS, kuris skiriasi nuo tipiškų imuninių ląstelių reakcijų į tokius dirgiklius.
FS-C3H ląstelių nereagavimas į LPS siejamas su esminio receptoriaus, atsakingo už LPS signalo perdavimą, nebuvimu arba jo pakitimu. Tyrimai parodė, kad, nepaisant nereagavimo į LPS, šios ląstelės gali būti aktyvuojamos alternatyviais keliais, pavyzdžiui, baltymų kinazės C (PKC) ir tirozino kinazės signaliniais mechanizmais, panašiais į tuos, kurie aktyvuojami į LPS reaguojančiose ląstelėse. Šių kinazių sąveika ir reguliacinis vaidmuo signaliniuose keliuose išryškina sudėtingus viduląstelinius mechanizmus, leidžiančius manyti, kad PKC ir tirozino kinazių keliai gali kompensuoti defektinį LPS signalą. Šis pastebėjimas atveria galimybes ištirti, kaip tirozinkinazėmis reguliuojamas fosforilinimas veikia bendrą šių pelių ląstelių atsaką.
Tęsiant FS-C3H ląstelių tyrimus labai svarbu suprasti jų hiporeakcijos į LPS molekulinį pagrindą, kuris gali būti susijęs su genetiniu Lpsn geno defektu. Gilindamiesi į šių ląstelių fosforilinimo profilius, palyginti su ląstelėmis, reaguojančiomis į LPS, mokslininkai siekia išsiaiškinti konkrečius molekulinius defektus, lemiančius pakitusį genų aktyvavimą ir proliferacijos reakciją. Už LPS sąveiką atsakingo geno produkto išskyrimas ir apibūdinimas galėtų padėti geriau suprasti imuninės sistemos sutrikimus ir nutiesti kelią naujiems terapiniams metodams gydant susijusius imuninius ir uždegiminius sutrikimus.
- Audinys
- Odos
- Liga
- Fibrosarkoma
02Klasifikacija
- Organizmas
- Pele
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Identifikatoriai
- Nuoroda
- FS-C3H (Cytion katalogo numeris 400418)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5755
04Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Sėjos tankis
- 2 x 104 ląstelės/cm2
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
06Donoras
- Veislė / porūšis
- C3H
07Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Atsakomybės apribojimas
- Mūsų ląstelės teikiamos tik in vitro laboratoriniams tyrimams ir nėra skirtos klinikiniam ar diagnostiniam naudojimui, jos taip pat nėra skirtos žmonėms ar naudojamos veterinarijos tikslais. Naudotojai privalo laikytis visų galiojančių rekomendacijų ir taisyklių, taikomų šių ląstelių tvarkymui ir naudojimui mokslinių tyrimų aplinkoje.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip
.jpg)