Pereiti prie turinio
FS-C3H
Audinys
Odos
Liga
Fibrosarkoma

Dokumentai

FS-C3H

Cell line · Prekės numeris 400418

The FS-C3H cell line, derived from the C3H/HeJ mouse strain, plays a pivotal role in studying host responses to endotoxins, particularly in the context of...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

FS-C3H ląstelių linija, gauta iš C3H/HeJ pelių padermės, atlieka svarbų vaidmenį tiriant šeimininko reakciją į endotoksinus, ypač vėžio tyrimų kontekste. Ši padermė išsiskiria atsparumu endotoksinui dėl specifinio nejautrumo lipopolisacharidui (LPS), pagrindiniam bakterijų endotoksino komponentui. Dėl šios savybės FS-C3H tapo neįkainojamu modeliu biocheminiams ir genetiniams imuninio atsako reguliavimo keliams tirti. Mokslininkai plačiai naudojo šią ląstelių liniją B limfocitų ir makrofagų dinamikai tirti, daugiausia dėmesio skirdami unikaliam jų nereagavimui į LPS, kuris skiriasi nuo tipiškų imuninių ląstelių reakcijų į tokius dirgiklius.

FS-C3H ląstelių nereagavimas į LPS siejamas su esminio receptoriaus, atsakingo už LPS signalo perdavimą, nebuvimu arba jo pakitimu. Tyrimai parodė, kad, nepaisant nereagavimo į LPS, šios ląstelės gali būti aktyvuojamos alternatyviais keliais, pavyzdžiui, baltymų kinazės C (PKC) ir tirozino kinazės signaliniais mechanizmais, panašiais į tuos, kurie aktyvuojami į LPS reaguojančiose ląstelėse. Šių kinazių sąveika ir reguliacinis vaidmuo signaliniuose keliuose išryškina sudėtingus viduląstelinius mechanizmus, leidžiančius manyti, kad PKC ir tirozino kinazių keliai gali kompensuoti defektinį LPS signalą. Šis pastebėjimas atveria galimybes ištirti, kaip tirozinkinazėmis reguliuojamas fosforilinimas veikia bendrą šių pelių ląstelių atsaką.

Tęsiant FS-C3H ląstelių tyrimus labai svarbu suprasti jų hiporeakcijos į LPS molekulinį pagrindą, kuris gali būti susijęs su genetiniu Lpsn geno defektu. Gilindamiesi į šių ląstelių fosforilinimo profilius, palyginti su ląstelėmis, reaguojančiomis į LPS, mokslininkai siekia išsiaiškinti konkrečius molekulinius defektus, lemiančius pakitusį genų aktyvavimą ir proliferacijos reakciją. Už LPS sąveiką atsakingo geno produkto išskyrimas ir apibūdinimas galėtų padėti geriau suprasti imuninės sistemos sutrikimus ir nutiesti kelią naujiems terapiniams metodams gydant susijusius imuninius ir uždegiminius sutrikimus.

Audinys
Odos
Liga
Fibrosarkoma

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Identifikatoriai

Nuoroda
FS-C3H (Cytion katalogo numeris 400418)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_5755

04Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
2 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

06Donoras

Veislė / porūšis
C3H