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HROC348
Tissu
Côlon sigmoïde
Maladie
Carcinome
Site métastatique
Non signalé (adénocarcinome du côlon sigmoïde primaire ; aucune métastase à distance confirmée au moment du prélèvement)

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HROC348

Cell line · Référence du produit 300719

HROC348 is a human colorectal carcinoma cell line derived from a primary tumor resected from an adult male patient diagnosed with sigmoid colon cancer. Th...

€800.00hors taxes et frais de port
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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
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1

01Informations générales

Description

HROC348 est une lignée cellulaire humaine de carcinome colorectal dérivée d'une tumeur primaire réséquée sur un patient adulte de sexe masculin chez qui un cancer du côlon sigmoïde a été diagnostiqué. La tumeur a été classée comme un adénocarcinome modérément avancé (T3, G3, N2), indiquant une invasion locale significative et une atteinte des ganglions lymphatiques, ce qui correspond à un comportement agressif de la tumeur. Le carcinome a pris naissance dans le côlon sigmoïde, un site anatomique commun pour le cancer colorectal sporadique, et présentait une stabilité des microsatellites (MSS), ce qui l'aligne sur le sous-type d'instabilité chromosomique (CIN) plutôt que sur la classe des tumeurs colorectales hypermutées à MSI élevé.

Le profilage moléculaire de HROC348 montre un statut de type sauvage pour KRAS et BRAF, ce qui suggère l'absence de mutations activatrices communes dans ces gènes qui sont fréquemment impliqués dans la progression du cancer colorectal et la résistance aux thérapies. Ce contexte moléculaire rend la lignée HROC348 particulièrement adaptée aux études axées sur la signalisation RAS/RAF non mutée et ses implications dans la croissance tumorale, la réponse thérapeutique et les mécanismes de résistance. La lignée cellulaire ne présente pas de phénotype de méthylation des îlots CpG (CIMP), ce qui confirme sa classification dans le sous-groupe des cancers colorectaux conventionnels (non hypermutés).

Sur le plan clinique, la tumeur présentait des métastases ganglionnaires (LN_pos = 2), mais des métastases à distance (M) n'ont été observées qu'une seule fois, et aucune atteinte du côlon droit n'a été enregistrée, ce qui correspond à un profil de cancer colorectal gauche. Ces caractéristiques, associées au statut MSS et aux marqueurs moléculaires, font de HROC348 un modèle représentatif pour l'étude de l'adénocarcinome colorectal gauche, de type sauvage KRAS/BRAF, stable aux microsatellites. Il présente également une valeur translationnelle pour les essais précliniques de thérapies ciblées et d'agents immuno-modulateurs dans les tumeurs MSS, qui répondent généralement moins bien au blocage des points de contrôle immunitaire.

Tissu
Côlon sigmoïde
Maladie
Carcinome
Site métastatique
Non signalé (adénocarcinome du côlon sigmoïde primaire ; aucune métastase à distance confirmée au moment du prélèvement)
Applications
Recherche sur le cancer colorectal ; biologie du cancer colorectal MSS à gènes KRAS/BRAF de type sauvage ; modélisation du cancer colorectal du côté gauche ; sensibilité aux médicaments dans les tumeurs RAS/RAF non mutées ; études menées par la biobanque HROC Linnebacher ; évaluation de l'immunothérapie du cancer colorectal ; oncologie préclinique

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
Sans OGM
Informations détaillées sur le statut OGM
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line from the HROC Linnebacher biobank. KRAS wild-type, BRAF wild-type, MSS, CIMP-negative.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Type de cellule
Cellules épithéliales
État du MSI
MSS

04Identifiants

Référence
HROC348 (numéro de catalogue Cytion 300719)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
77 ans
Origine ethnique
Caucasien