コンテンツへスキップ
HROC348
ティッシュ
S状結腸
病気
癌腫
転移部位
報告なし(S状結腸の原発性腺癌;検体採取時点で遠隔転移は確認されなかった)

HROC348

Cell line · 製品番号 300719

HROC348 is a human colorectal carcinoma cell line derived from a primary tumor resected from an adult male patient diagnosed with sigmoid colon cancer. Th...

€800.00税・送料別
在庫あり
ロット
おすすめ(最も新しいロット)
  • CoA
1

01概要

説明

HROC348は、S状結腸癌と診断された成人男性患者から切除された原発腫瘍に由来するヒト大腸癌細胞株である。腫瘍は中等度進行腺癌(T3、G3、N2)に分類され、局所浸潤とリンパ節転移が顕著であり、攻撃的な腫瘍の挙動と一致していた。この癌は、散発性大腸癌の解剖学的部位として一般的なS状結腸に発生し、マイクロサテライト安定性(MSS)を示し、大腸癌のMSI-high hypermutatedクラスではなく、染色体不安定性(CIN)サブタイプに分類された。

HROC348の分子プロファイリングは、KRASとBRAFの両方が野生型であることを示しており、大腸癌の進行や治療抵抗性にしばしば関与するこれらの遺伝子に共通の活性化変異がないことを示唆している。このような分子的背景から、HROC348は、非変異型RAS/RAFシグナル伝達と、腫瘍増殖、治療反応、抵抗性メカニズムにおけるその意味に焦点を当てた研究に特に適している。この細胞株はCpG島メチレーター表現型(CIMP)を示さないので、従来の(非突然変異型)大腸癌サブグループに分類されることがさらに支持される。

臨床的には、この腫瘍はリンパ節転移陽性(LN_pos = 2)であったが、遠隔転移(M)は1度だけ認められ、右側結腸病変は記録されておらず、左側結腸直腸癌のプロフィールと一致していた。これらの特徴は、MSSの状態や分子マーカーと相まって、HROC348を左側、KRAS/BRAF野生型、マイクロサテライト安定大腸腺癌を研究するための代表的なモデルとして位置づける。また、HROC348は、一般的に免疫チェックポイント阻害薬に対する反応性が低いMSS腫瘍における標的治療薬や免疫調節薬の前臨床試験において、トランスレーショナルな価値を提供する。

ティッシュ
S状結腸
病気
癌腫
転移部位
報告なし(S状結腸の原発性腺癌;検体採取時点で遠隔転移は確認されなかった)
用途
大腸がん研究;KRAS/BRAF野生型MSS大腸がんの生物学的特性;左側大腸がんのモデル化;RAS/RAF非変異腫瘍における薬剤感受性;HROC Linnebacherバイオバンク研究;大腸がんの免疫療法の評価;前臨床腫瘍学

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
非遺伝子組み換え
GMOのステータスに関する詳細
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line from the HROC Linnebacher biobank. KRAS wild-type, BRAF wild-type, MSS, CIMP-negative.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
細胞の種類
上皮細胞
MSIの状態
MSS

04識別子

引用
HROC348 (Cytion カタログ番号 300719)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
Not assigned

05取り扱いと飼育

培地
DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
77年
民族
白人