Prejsť na obsah
HROC348
Tkanivo
Sigmoidné hrubé črevo
Choroba
Karcinóm
Miesto metastáz
Neuvádza sa (primárny adenokarcinóm sigmoidného čreva; v čase odberu vzorky neboli potvrdené žiadne vzdialené metastázy)

Dokumenty

HROC348

Cell line · Číslo výrobku 300719

HROC348 is a human colorectal carcinoma cell line derived from a primary tumor resected from an adult male patient diagnosed with sigmoid colon cancer. Th...

€800.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

HROC348 je bunková línia ľudského kolorektálneho karcinómu odvodená z primárneho nádoru resekovaného u dospelého muža s diagnózou rakoviny sigmoidného tračníka. Nádor bol klasifikovaný ako stredne pokročilý adenokarcinóm (T3, G3, N2), čo naznačuje významnú lokálnu inváziu a postihnutie lymfatických uzlín, čo zodpovedá agresívnemu správaniu nádoru. Karcinóm vznikol v sigmoideu, bežnom anatomickom mieste sporadického kolorektálneho karcinómu, a vykazoval mikrosatelitnú stabilitu (MSS), čo ho radí skôr k podtypu chromozómovej nestability (CIN) než k triede hypermutovaných kolorektálnych nádorov s vysokým MSI.

Molekulárne profilovanie HROC348 vykazuje divoký typ KRAS aj BRAF, čo naznačuje neprítomnosť spoločných aktivačných mutácií v týchto génoch, ktoré sa často podieľajú na progresii kolorektálneho karcinómu a rezistencii na liečbu. Vďaka tomuto molekulárnemu pozadiu je HROC348 mimoriadne vhodný na štúdie zamerané na nemutovanú signalizáciu RAS/RAF a jej vplyv na rast nádoru, terapeutickú odpoveď a mechanizmy rezistencie. Bunková línia nevykazuje fenotyp CpG ostrovčekového metylátora (CIMP), čo ďalej podporuje jej zaradenie do podskupiny konvenčného (nehypermutovaného) kolorektálneho karcinómu.

Klinicky bol nádor pozitívny na metastázy v lymfatických uzlinách (LN_pos = 2), ale vzdialené metastázy (M) boli zaznamenané len raz a nebolo zaznamenané žiadne pravostranné postihnutie hrubého čreva, čo zodpovedá profilu ľavostranného kolorektálneho karcinómu. Tieto vlastnosti v kombinácii so stavom MSS a molekulárnymi markermi stavajú HROC348 do pozície reprezentatívneho modelu na štúdium ľavostranného, KRAS/BRAF divokého typu, mikrosatelitne stabilného kolorektálneho adenokarcinómu. Ponúka tiež translačnú hodnotu pre predklinické testovanie cielených terapií a imunomodulačných látok v nádoroch MSS, ktoré sú zvyčajne menej citlivé na blokádu imunitných kontrolných bodov.

Tkanivo
Sigmoidné hrubé črevo
Choroba
Karcinóm
Miesto metastáz
Neuvádza sa (primárny adenokarcinóm sigmoidného čreva; v čase odberu vzorky neboli potvrdené žiadne vzdialené metastázy)
Aplikácie
Výskum kolorektálneho karcinómu; biológia kolorektálneho karcinómu (CRC) s MSS a divokými typmi génov KRAS/BRAF; modelovanie ľavostranného kolorektálneho karcinómu; citlivosť na liečbu u nádorov s nemutovanými génmi RAS/RAF; štúdie s využitím biobanky HROC Linnebacher; hodnotenie imunoterapie kolorektálneho karcinómu; predklinická onkológia

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o štatúte GMO
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line from the HROC Linnebacher biobank. KRAS wild-type, BRAF wild-type, MSS, CIMP-negative.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Epitelové bunky
Stav MSI
MSS

04Identifikátory

Citácia
HROC348 (katalógové číslo Cytion 300719)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
77 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský