Tartalomra ugrás
HROC348
Szövet
Szigmoid vastagbél
Betegség
Karcinóma
Áttétes hely
Nem jelentették (elsődleges sigmoidbél-adenokarcinóma; a mintavétel időpontjában nem volt igazolt távoli áttét)

Dokumentumok

HROC348

Cell line · Termékszám 300719

HROC348 is a human colorectal carcinoma cell line derived from a primary tumor resected from an adult male patient diagnosed with sigmoid colon cancer. Th...

€800.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HROC348 egy humán kolorektális karcinóma sejtvonal, amely egy felnőtt férfi betegből kivágott primer tumorból származik, akinél szigmabélrákot diagnosztizáltak. A daganatot közepesen előrehaladott adenokarcinómának (T3, G3, N2) minősítették, ami jelentős helyi inváziót és nyirokcsomó-érintettséget jelzett, ami összhangban van a tumor agresszív viselkedésével. A karcinóma a szigmabélből, a sporadikus vastagbélrák gyakori anatómiai helyéről származott, és mikroszatellita-stabilitást (MSS) mutatott, ami inkább a kromoszóma-instabilitás (CIN) altípusba sorolja, mint a vastagbéldaganatok MSI-magasan hipermutált osztályába.

A HROC348 molekuláris profilalkotása mind a KRAS, mind a BRAF esetében vad típusú státuszt mutat, ami arra utal, hogy ezek a gének nem rendelkeznek közös aktiváló mutációkkal, amelyek gyakran szerepet játszanak a vastagbélrák progressziójában és a terápiás rezisztenciában. Ez a molekuláris háttér teszi a HROC348-at különösen alkalmassá a nem mutálódott RAS/RAF jelátvitelre és annak a tumor növekedésére, a terápiás válaszra és a rezisztencia mechanizmusaira gyakorolt hatására összpontosító vizsgálatokra. A sejtvonal nem mutatja a CpG-sziget-metilátor fenotípust (CIMP), ami tovább erősíti a hagyományos (nem hipermutált) vastagbélrák alcsoportba való besorolását.

Klinikai szempontból a tumor pozitív volt nyirokcsomó-metasztázisra (LN_pos = 2), de távoli áttétet (M) csak egyszer észleltek, és nem jegyeztek fel jobb oldali vastagbél érintettséget, ami megfelel a bal oldali vastagbélrák profiljának. Ezek a jellemzők az MSS-státussal és a molekuláris markerekkel együtt a HROC348-at reprezentatív modellként pozícionálják a bal oldali, KRAS/BRAF vad típusú, mikroszatellita-stabil kolorektális adenokarcinóma tanulmányozására. Emellett transzlációs értéket kínál a célzott terápiák és immunmoduláló szerek preklinikai teszteléséhez az MSS-tumorokban, amelyek jellemzően kevésbé reagálnak az immunellenőrzési pontblokádra.

Szövet
Szigmoid vastagbél
Betegség
Karcinóma
Áttétes hely
Nem jelentették (elsődleges sigmoidbél-adenokarcinóma; a mintavétel időpontjában nem volt igazolt távoli áttét)
Alkalmazások
Vastagbélrák-kutatás; a KRAS/BRAF vad típusú, MSS vastagbélrák biológiája; a bal oldali vastagbélrák modellezése; a gyógyszerérzékenység a nem mutált RAS/RAF daganatokban; a HROC Linnebacher biobank tanulmányai; a vastagbélrák immunterápiájának értékelése; preklinikai onkológia

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-mentes
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line from the HROC Linnebacher biobank. KRAS wild-type, BRAF wild-type, MSS, CIMP-negative.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Epithel sejtek
MSI állapot
MSS

04Azonosítók

Hivatkozás
HROC348 (Cytion katalógusszám 300719)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
77 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi