HROC348

HROC348 on ihmisen paksusuolen karsinooman solulinja, joka on peräisin primaarikasvaimesta, joka on leikattu aikuiselta miespotilaalta, jolla on diagnosoitu sigmoidipaksusuolen syöpä. Kasvain luokiteltiin kohtalaisen pitkälle edenneeksi adenokarsinoomaksi (T3, G3, N2), ja se osoitti merkittävää paikallista invaasiota ja imusolmukkeiden osallistumista, mikä vastaa aggressiivista kasvaimen käyttäytymistä. Karsinooma oli peräisin sigmoidisesta paksusuolesta, joka on sporadisen paksusuolisyövän yleinen anatominen sijaintipaikka, ja siinä esiintyi mikrosatelliittistabiilisuutta (MSS), mikä luokittelee sen pikemminkin kromosomi-instabiiliuden (CIN) alatyyppiin kuin paksusuolen kasvainten MSI-korkean hypermutatoituneen luokan alatyyppiin.

HROC348:n molekyyliprofilointi osoittaa, että se on sekä KRAS- että BRAF-geenin osalta villityyppinen, mikä viittaa siihen, että näissä geeneissä ei ole yleisiä aktivoivia mutaatioita, jotka ovat usein osallisina paksusuolen syövän etenemisessä ja hoitoresistenssissä. Tämän molekyylitaustan vuoksi HROC348 soveltuu erityisen hyvin tutkimuksiin, joissa keskitytään mutaatioiden ulkopuoliseen RAS/RAF-signalointiin ja sen vaikutuksiin kasvaimen kasvuun, hoitovasteeseen ja resistenssimekanismeihin. Solulinjalla ei esiinny CpG-saarekkeiden metylaattorin fenotyyppiä (CIMP), mikä tukee entisestään sen luokittelua tavanomaiseen (ei-hypermutoituneeseen) kolorektaalisyövän alaryhmään.

Kliinisesti kasvain oli positiivinen imusolmukemetastaasien suhteen (LN_pos = 2), mutta etämetastaasia (M) todettiin vain kerran, eikä oikeanpuoleista paksusuolta ollut mukana, mikä vastaa vasemmanpuoleisen paksusuolen syövän profiilia. Nämä ominaisuudet yhdessä MSS-statuksen ja molekyylimarkkereiden kanssa tekevät HROC348:sta edustavan mallin vasemmanpuoleisen, KRAS/BRAF-villiintyneen, mikrosatelliittistabiilin kolorektaalisen adenokarsinooman tutkimiseen. Se tarjoaa myös translationaalista arvoa kohdennettujen hoitojen ja immuunijärjestelmää muokkaavien aineiden prekliinisessä testauksessa MSS-kasvaimissa, jotka tyypillisesti reagoivat huonommin immuunijärjestelmän tarkistuspisteiden estoon.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa