HROC348

HROC348 es una línea celular de carcinoma colorrectal humano derivada de un tumor primario resecado de un paciente varón adulto diagnosticado de cáncer de colon sigmoide. El tumor fue clasificado como un adenocarcinoma moderadamente avanzado (T3, G3, N2), indicando una invasión local significativa y afectación de los ganglios linfáticos, consistente con un comportamiento tumoral agresivo. El carcinoma se originó en el colon sigmoide, un lugar anatómico común para el cáncer colorrectal esporádico, y presentaba estabilidad de microsatélites (MSS), lo que lo alinea con el subtipo de inestabilidad cromosómica (CIN) más que con la clase de tumores colorrectales hipermutados con alta MSI.

El perfil molecular de HROC348 muestra un estado de tipo salvaje tanto para KRAS como para BRAF, lo que sugiere la ausencia de mutaciones activadoras comunes en estos genes, frecuentemente implicados en la progresión del cáncer colorrectal y en la resistencia al tratamiento. Estos antecedentes moleculares hacen que HROC348 sea especialmente adecuada para estudios centrados en la señalización RAS/RAF no mutada y sus implicaciones en el crecimiento tumoral, la respuesta terapéutica y los mecanismos de resistencia. La línea celular no muestra el fenotipo metilador de islas CpG (CIMP), lo que respalda aún más su clasificación dentro del subgrupo de cáncer colorrectal convencional (no hipermutado).

Clínicamente, el tumor era positivo para metástasis en ganglios linfáticos (LN_pos = 2), pero sólo se observó metástasis a distancia (M) una vez, y no se registró afectación del colon derecho, lo que concuerda con un perfil de cáncer colorrectal izquierdo. Estas características, combinadas con el estado MSS y los marcadores moleculares, posicionan al HROC348 como un modelo representativo para estudiar el adenocarcinoma colorrectal del lado izquierdo, con KRAS/BRAF de tipo salvaje y estable por microsatélite. También ofrece valor traslacional para las pruebas preclínicas de terapias dirigidas y agentes inmunomoduladores en tumores MSS, que suelen responder menos al bloqueo de puntos de control inmunitarios.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía