HROC348

HROC348 er en human kolorektal karsinomcellelinje som stammer fra en primærsvulst som ble fjernet fra en voksen mannlig pasient diagnostisert med sigmoid kolonkreft. Svulsten ble klassifisert som et moderat avansert adenokarsinom (T3, G3, N2), noe som indikerer betydelig lokal invasjon og lymfeknuteinvolvering, i samsvar med aggressiv tumoradferd. Karsinomet oppsto i sigmoideum, en vanlig anatomisk lokalisasjon for sporadisk kolorektal kreft, og viste mikrosatellittstabilitet (MSS), noe som plasserer den i subtypen kromosomal instabilitet (CIN) i stedet for i den MSI-høyt hypermuterte klassen av kolorektale tumorer.

Molekylær profilering av HROC348 viser villtypestatus for både KRAS og BRAF, noe som tyder på fravær av vanlige aktiverende mutasjoner i disse genene, som ofte er involvert i progresjon av kolorektal kreft og terapiresistens. Denne molekylære bakgrunnen gjør HROC348 spesielt egnet for studier som fokuserer på ikke-mutert RAS/RAF-signalering og dens betydning for tumorvekst, behandlingsrespons og resistensmekanismer. Cellelinjen viser ikke CpG-øy-metyleringsfenotypen (CIMP), noe som ytterligere støtter klassifiseringen av den innenfor den konvensjonelle (ikke-hypermuterte) undergruppen av kolorektal kreft.

Klinisk var svulsten positiv for lymfeknutemetastaser (LN_pos = 2), men fjernmetastaser (M) ble bare registrert én gang, og det ble ikke registrert noe høyresidig koloninvolvering, noe som er i samsvar med en venstresidig kolorektal kreftprofil. Disse trekkene, kombinert med MSS-status og molekylære markører, gjør HROC348 til en representativ modell for å studere venstresidig, KRAS/BRAF-viltype, mikrosatellittstabilt kolorektalt adenokarsinom. Den har også stor overføringsverdi for preklinisk testing av målrettede terapier og immunmodulerende midler i MSS-svulster, som vanligvis er mindre responsive på immunsjekkpunktblokade.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring