HROC348

HROC348 ist eine humane Kolorektalkarzinom-Zelllinie, die von einem Primärtumor stammt, der einem erwachsenen männlichen Patienten mit der Diagnose Sigmakolonkarzinom entnommen wurde. Der Tumor wurde als mäßig fortgeschrittenes Adenokarzinom (T3, G3, N2) eingestuft und wies eine erhebliche lokale Invasion und Lymphknotenbefall auf, was auf ein aggressives Tumorverhalten hindeutet. Das Karzinom entstand im Colon sigmoideum, einer häufigen anatomischen Stelle für sporadische kolorektale Karzinome, und wies eine Mikrosatellitenstabilität (MSS) auf, die es eher dem Subtyp der chromosomalen Instabilität (CIN) als der MSI-high hypermutated-Klasse kolorektaler Tumoren zuordnet.

Die molekulare Profilierung von HROC348 zeigt einen Wildtyp-Status sowohl für KRAS als auch für BRAF, was darauf hindeutet, dass in diesen Genen, die häufig mit dem Fortschreiten von Darmkrebs und Therapieresistenz in Verbindung gebracht werden, keine gemeinsamen aktivierenden Mutationen vorliegen. Aufgrund dieses molekularen Hintergrunds eignet sich HROC348 besonders für Studien, die sich auf die nicht mutierte RAS/RAF-Signalübertragung und deren Auswirkungen auf das Tumorwachstum, das Ansprechen auf Therapien und die Resistenzmechanismen konzentrieren. Die Zelllinie weist keinen CpG-Insel-Methylator-Phänotyp (CIMP) auf, was ihre Einstufung in die Untergruppe der konventionellen (nicht-hypermutierten) kolorektalen Karzinome weiter unterstützt.

Klinisch war der Tumor positiv für Lymphknotenmetastasen (LN_pos = 2), aber Fernmetastasen (M) wurden nur einmal festgestellt, und es wurde keine rechtsseitige Kolonbeteiligung verzeichnet, was mit einem linksseitigen Kolorektalkarzinom-Profil übereinstimmt. Diese Merkmale in Verbindung mit dem MSS-Status und den molekularen Markern machen HROC348 zu einem repräsentativen Modell für die Untersuchung von linksseitigen, KRAS/BRAF-Wildtyp- und Mikrosatelliten-stabilen kolorektalen Adenokarzinomen. Darüber hinaus bietet es einen translationalen Wert für die präklinische Erprobung zielgerichteter Therapien und immunmodulatorischer Wirkstoffe bei MSS-Tumoren, die in der Regel weniger gut auf die Blockade von Immun-Checkpoints ansprechen.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung