HROC348

HROC348 è una linea cellulare di carcinoma colorettale umano derivata da un tumore primario resecato da un paziente maschio adulto con diagnosi di cancro del colon sigmoideo. Il tumore è stato classificato come adenocarcinoma moderatamente avanzato (T3, G3, N2), con una significativa invasione locale e coinvolgimento linfonodale, coerenti con un comportamento aggressivo del tumore. Il carcinoma ha avuto origine nel colon sigmoideo, un sito anatomico comune per il cancro colorettale sporadico, e ha presentato una stabilità dei microsatelliti (MSS), che lo allinea al sottotipo dell'instabilità cromosomica (CIN) piuttosto che alla classe dei tumori colorettali ipermutati ad alto MSI.

Il profilo molecolare di HROC348 mostra uno stato wild-type sia per KRAS che per BRAF, suggerendo l'assenza di mutazioni attivanti comuni in questi geni, spesso implicati nella progressione del cancro colorettale e nella resistenza alla terapia. Questo background molecolare rende HROC348 particolarmente adatto a studi incentrati sulla segnalazione RAS/RAF non mutata e sulle sue implicazioni nella crescita tumorale, nella risposta terapeutica e nei meccanismi di resistenza. La linea cellulare non mostra il fenotipo di metilazione delle isole CpG (CIMP), a ulteriore sostegno della sua classificazione nel sottogruppo del cancro colorettale convenzionale (non ipermutato).

Dal punto di vista clinico, il tumore era positivo per le metastasi linfonodali (LN_pos = 2), ma le metastasi a distanza (M) sono state notate solo una volta e non è stato registrato alcun coinvolgimento del colon destro, coerentemente con un profilo di cancro colorettale sinistro. Queste caratteristiche, insieme allo stato MSS e ai marcatori molecolari, posizionano HROC348 come modello rappresentativo per lo studio dell'adenocarcinoma colorettale sinistro, KRAS/BRAF wild-type, microsatellite-stabile. Offre inoltre un valore traslazionale per la sperimentazione preclinica di terapie mirate e agenti immuno-modulatori nei tumori MSS, che in genere sono meno reattivi al blocco dei checkpoint immunitari.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia