HROC348

A HROC348 é uma linha celular de carcinoma colorrectal humano derivada de um tumor primário ressecado de um doente adulto do sexo masculino a quem foi diagnosticado cancro do cólon sigmoide. O tumor foi classificado como um adenocarcinoma moderadamente avançado (T3, G3, N2), indicando uma invasão local significativa e envolvimento dos nódulos linfáticos, consistente com um comportamento agressivo do tumor. O carcinoma teve origem no cólon sigmoide, um local anatómico comum para o cancro colorrectal esporádico, e apresentava estabilidade de microssatélites (MSS), o que o alinha com o subtipo de instabilidade cromossómica (CIN) e não com a classe de tumores colorrectais com elevada hipermutação MSI.

O perfil molecular do HROC348 mostra o estado de tipo selvagem tanto para o KRAS como para o BRAF, sugerindo a ausência de mutações activadoras comuns nestes genes que estão frequentemente implicados na progressão do cancro colorrectal e na resistência à terapêutica. Este historial molecular torna a HROC348 particularmente adequada para estudos centrados na sinalização RAS/RAF não mutada e nas suas implicações no crescimento tumoral, na resposta terapêutica e nos mecanismos de resistência. A linha celular não apresenta o fenótipo de metilação de ilhas CpG (CIMP), o que apoia ainda mais a sua classificação no subgrupo de cancro colorrectal convencional (não hipermutado).

Clinicamente, o tumor era positivo para metástases nos gânglios linfáticos (LN_pos = 2), mas só se observou uma metástase à distância (M) e não se registou qualquer envolvimento do cólon direito, o que é consistente com um perfil de cancro colorrectal do lado esquerdo. Estas caraterísticas, combinadas com o estatuto de MSS e os marcadores moleculares, posicionam o HROC348 como um modelo representativo para o estudo do adenocarcinoma colorrectal do lado esquerdo, do tipo selvagem KRAS/BRAF, estável por microssatélites. Também oferece valor translacional para testes pré-clínicos de terapias direcionadas e agentes imunomoduladores em tumores MSS, que são tipicamente menos reactivos ao bloqueio do ponto de controlo imunitário.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia