HROC348

HROC348 to ludzka linia komórkowa raka jelita grubego pochodząca z guza pierwotnego wyciętego u dorosłego mężczyzny, u którego zdiagnozowano raka esicy. Guz został sklasyfikowany jako umiarkowanie zaawansowany gruczolakorak (T3, G3, N2), wskazujący na znaczną miejscową inwazję i zajęcie węzłów chłonnych, co jest zgodne z agresywnym zachowaniem guza. Nowotwór powstał w esicy, częstym anatomicznym miejscu sporadycznego raka jelita grubego, i wykazywał stabilność mikrosatelitarną (MSS), co przypisuje go raczej do podtypu niestabilności chromosomalnej (CIN) niż do klasy nowotworów jelita grubego z wysokimi hipermutacjami MSI.

Profilowanie molekularne HROC348 wykazuje status typu dzikiego zarówno dla KRAS, jak i BRAF, co sugeruje brak wspólnych mutacji aktywujących w tych genach, które są często związane z progresją raka jelita grubego i opornością na terapię. To tło molekularne sprawia, że HROC348 jest szczególnie odpowiedni do badań skoncentrowanych na niezmutowanej sygnalizacji RAS/RAF i jej implikacjach we wzroście guza, odpowiedzi terapeutycznej i mechanizmach oporności. Linia komórkowa nie wykazuje fenotypu metylatora wysp CpG (CIMP), co dodatkowo wspiera jej klasyfikację w podgrupie konwencjonalnego (niezmutowanego) raka jelita grubego.

Klinicznie, guz był dodatni pod względem przerzutów do węzłów chłonnych (LN_pos = 2), ale odległe przerzuty (M) odnotowano tylko raz i nie odnotowano prawostronnego zajęcia okrężnicy, co jest zgodne z profilem lewostronnego raka jelita grubego. Cechy te, w połączeniu ze statusem MSS i markerami molekularnymi, pozycjonują HROC348 jako reprezentatywny model do badania lewostronnego gruczolakoraka jelita grubego stabilnego mikrosatelitarnie z dzikim typem KRAS/BRAF. Oferuje on również wartość translacyjną dla przedklinicznych testów terapii celowanych i środków immunomodulujących w guzach MSS, które zazwyczaj słabiej reagują na blokadę immunologicznych punktów kontrolnych.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym