HROC348

HROC348 je buněčná linie lidského kolorektálního karcinomu odvozená z primárního nádoru resekovaného u dospělého muže s diagnózou karcinomu sigmoidea. Nádor byl klasifikován jako středně pokročilý adenokarcinom (T3, G3, N2), což svědčí o významné lokální invazi a postižení lymfatických uzlin, což odpovídá agresivnímu chování nádoru. Karcinom vznikl v sigmoideu, což je časté anatomické místo pro sporadický kolorektální karcinom, a vykazoval mikrosatelitní stabilitu (MSS), což jej řadí spíše k podtypu chromozomální nestability (CIN) než k hypermutované třídě kolorektálních nádorů s vysokým MSI.

Molekulární profilování HROC348 vykazuje divoký typ pro KRAS i BRAF, což naznačuje nepřítomnost běžných aktivačních mutací v těchto genech, které se často podílejí na progresi kolorektálního karcinomu a rezistenci na léčbu. Díky tomuto molekulárnímu pozadí je HROC348 zvláště vhodný pro studie zaměřené na nemutovanou signalizaci RAS/RAF a její důsledky pro růst nádoru, léčebnou odpověď a mechanismy rezistence. Tato buněčná linie nevykazuje fenotyp CpG ostrovního metylátoru (CIMP), což dále podporuje její zařazení do podskupiny konvenčního (nehypermutovaného) kolorektálního karcinomu.

Klinicky byl nádor pozitivní na metastázy v lymfatických uzlinách (LN_pos = 2), ale vzdálené metastázy (M) byly zaznamenány pouze jednou a nebylo zaznamenáno žádné pravostranné postižení tlustého střeva, což odpovídá levostrannému profilu kolorektálního karcinomu. Tyto vlastnosti spolu se stavem MSS a molekulárními markery staví HROC348 do pozice reprezentativního modelu pro studium levostranného, KRAS/BRAF divokého typu, mikrosatelitově stabilního kolorektálního adenokarcinomu. Nabízí také translační hodnotu pro preklinické testování cílených terapií a imunomodulačních látek u nádorů s MSS, které jsou obvykle méně citlivé na blokádu imunitních kontrolních bodů.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení