الانتقال إلى المحتوى
HROC348
الأنسجة
القولون السيني
المرض
الورم السرطاني
موقع الانتشار
لم يتم الإبلاغ عن ذلك (سرطان غدي أولي في القولون السيني؛ لم يتم تأكيد وجود نقائل بعيدة وقت أخذ العينة)

المستندات

HROC348

Cell line · رقم المنتج 300719

HROC348 is a human colorectal carcinoma cell line derived from a primary tumor resected from an adult male patient diagnosed with sigmoid colon cancer. Th...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

HROC348 هو خط خلوي لسرطان القولون والمستقيم البشري مشتق من ورم أولي تم استئصاله من مريض بالغ ذكر تم تشخيص إصابته بسرطان القولون السيني. صُنّف الورم على أنه سرطان غدي متقدم بشكل معتدل (T3، G3، N2)، مما يشير إلى غزو موضعي كبير وتورّط العقدة اللمفاوية، بما يتوافق مع سلوك الورم العدواني. نشأ الورم السرطاني في القولون السيني، وهو موقع تشريحي شائع لسرطان القولون والمستقيم المتقطع، وظهر مع استقرار الأقمار الصناعية الدقيقة (MSS)، مما يجعله يتماشى مع النوع الفرعي لعدم الاستقرار الكروموسومي (CIN) بدلاً من فئة أورام القولون والمستقيم ذات التصلب المتعدد المفرط في التحوير MSI.

يُظهر التنميط الجزيئي لـ HROC348 حالة من النوع البري لكل من KRAS و BRAF، مما يشير إلى عدم وجود طفرات تنشيطية شائعة في هذه الجينات التي كثيراً ما تكون متورطة في تطور سرطان القولون والمستقيم ومقاومة العلاج. هذه الخلفية الجزيئية تجعل HROC348 مناسبًا بشكل خاص للدراسات التي تركز على إشارات RAS/RAF غير المتحوّرة وآثارها في نمو الورم والاستجابة العلاجية وآليات المقاومة. لا يُظهر الخط الخلوي النمط الظاهري لميثيل الجزر CpG (CIMP)، مما يدعم تصنيفه ضمن المجموعة الفرعية التقليدية (غير المتحوّرة) لسرطان القولون والمستقيم.

من الناحية السريرية، كان الورم إيجابيًا لورم خبيث في العقدة الليمفاوية (LN_pos = 2)، ولكن لوحظ وجود ورم خبيث بعيد (M) مرة واحدة فقط، ولم يتم تسجيل أي إصابة في الجانب الأيمن من القولون، بما يتوافق مع نمط سرطان القولون والمستقيم الأيسر. هذه السمات، جنبًا إلى جنب مع حالة MSS والعلامات الجزيئية، تضع HROC348 كنموذج تمثيلي لدراسة سرطان القولون والمستقيم الغدي في الجانب الأيسر، من النوع البري KRAS/BRAF، المستقر في السواتل الدقيقة. كما أنه يوفر قيمة انتقالية للاختبارات ما قبل السريرية للعلاجات المستهدفة والعوامل المعدلة للمناعة في أورام سرطان القولون والمستقيم الأيسر التي عادة ما تكون أقل استجابة لحصار نقاط التفتيش المناعية.

الأنسجة
القولون السيني
المرض
الورم السرطاني
موقع الانتشار
لم يتم الإبلاغ عن ذلك (سرطان غدي أولي في القولون السيني؛ لم يتم تأكيد وجود نقائل بعيدة وقت أخذ العينة)
التطبيقات
أبحاث سرطان القولون والمستقيم؛ بيولوجيا سرطان القولون والمستقيم من النوع MSS ذي الجينات KRAS/BRAF في شكلها الطبيعي؛ نمذجة سرطان القولون والمستقيم في الجانب الأيسر؛ حساسية الأدوية في الأورام غير المتحولة جينياً من نوع RAS/RAF؛ دراسات بنك العينات الحيوية HROC Linnebacher؛ تقييم العلاج المناعي لسرطان القولون والمستقيم؛ علم الأورام في المرحلة ما قبل السريرية

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
خالية من الكائنات المعدلة وراثيًا
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line from the HROC Linnebacher biobank. KRAS wild-type, BRAF wild-type, MSS, CIMP-negative.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
نوع الخلية
الخلايا الظهارية
حالة MSI
MSS

04المعرّفات

المرجع
HROC348 (كتالوج سيتيون رقم 300719)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
Not assigned

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
77 سنة
الأصل العرقي
قوقازي