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KPL-4
Tissu
Sein
Maladie
Carcinome inflammatoire du sein
Site métastatique
Épanchement pleural
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KPL4

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KPL-4

Cell line · Référence du produit 305578

The KPL-4 cell line is a human breast cancer model originally derived from the malignant pleural effusion of a patient with inflammatory breast cancer. Th...

€550.00hors taxes et frais de port
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Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire KPL-4 est un modèle de cancer du sein humain dérivé à l'origine de l'épanchement pleural malin d'une patiente atteinte d'un cancer du sein inflammatoire. Cette lignée cellulaire présente une surexpression et une amplification de HER2 (ErbB-2), ainsi que l'expression d'autres récepteurs de la famille ErbB, notamment HER1 (EGFR) et HER3. Ces caractéristiques la rendent particulièrement utile pour étudier les mécanismes moléculaires qui sous-tendent les cancers du sein agressifs HER2-positifs et pour tester des thérapies ciblées.

Les cellules KPL-4 sont très tumorigènes et ont été utilisées pour établir des modèles de xénogreffes chez des souris immunodéficientes. Ces modèles ont démontré que les tumeurs KPL-4 sécrètent des quantités importantes d'interleukine-6 (IL-6), contribuant à la cachexie des animaux hôtes. La sécrétion d'IL-6 est en corrélation avec la charge tumorale, ce qui met en évidence les effets systémiques de la biologie tumorale dans les cancers HER2-positifs. Il est important de noter que les cellules KPL-4 répondent aux thérapies anti-HER2 telles que le trastuzumab, bien que l'efficacité in vivo de ces traitements soit variable, potentiellement en raison de la nature agressive de ce modèle de cancer.

La lignée cellulaire a également été exploitée dans le cadre de recherches thérapeutiques avancées. Par exemple, les conjugués anticorps-mimétiques photoactivants (AMDC) ciblant HER2 se sont révélés efficaces dans les modèles de xénogreffes KPL-4. Ces thérapies associent des molécules de liaison spécifiques à HER2 à des charges utiles cytotoxiques activées par la lumière, ce qui permet d'obtenir une réduction significative de la tumeur avec des effets hors cible minimes. Ces études soulignent l'utilité des cellules KPL-4 dans l'évaluation de nouvelles modalités thérapeutiques pour le cancer du sein HER2-positif.

Tissu
Sein
Maladie
Carcinome inflammatoire du sein
Site métastatique
Épanchement pleural
Synonymes
  • KPL4

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
État du MSI
Stable (MSS)

04Identifiants

Référence
KPL-4 (numéro de catalogue Cytion 305578)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5310

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utiliser 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec TrypLE Express, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
52 ans
Origine ethnique
Japonais