Gå direkte til indholdet
KPL-4
Væv
Bryst
Sygdom
Inflammatorisk karcinom i brystet
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
KPL4

Dokumenter

KPL-4

Cell line · Varenummer 305578

The KPL-4 cell line is a human breast cancer model originally derived from the malignant pleural effusion of a patient with inflammatory breast cancer. Th...

€550.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

KPL-4-cellelinjen er en human brystkræftmodel, der oprindeligt stammer fra et malignt pleuraeffusion fra en patient med inflammatorisk brystkræft. Denne cellelinje udviser overekspression og amplifikation af HER2 (ErbB-2) samt ekspression af andre ErbB-familiereceptorer, herunder HER1 (EGFR) og HER3. Disse egenskaber gør den særlig relevant til at studere de molekylære mekanismer, der ligger til grund for aggressiv HER2-positiv brystkræft, og til at teste målrettede terapier.

KPL-4-celler er meget tumorigeniske og er blevet brugt til at etablere xenotransplantationsmodeller i immundefekte mus. Disse modeller har vist, at KPL-4-tumorer udskiller betydelige mængder interleukin-6 (IL-6), hvilket bidrager til kakeksi hos værtsdyrene. Udskillelsen af IL-6 korrelerer med tumorbyrden, hvilket fremhæver de systemiske effekter af tumorbiologi i HER2-positive kræftformer. Det er vigtigt, at KPL-4-celler reagerer på anti-HER2-behandlinger som trastuzumab, selv om in vivo-effekten af disse behandlinger er variabel, hvilket potentielt skyldes denne kræftmodels aggressive natur.

Cellelinjen er også blevet udnyttet i avanceret terapeutisk forskning. For eksempel har fotoaktiverende antistof-mimetiske lægemiddelkonjugater (AMDC'er) rettet mod HER2 vist sig at være effektive i KPL-4-xenograftmodeller. Disse terapier kombinerer HER2-specifikke bindingsmolekyler med cytotoksiske stoffer, der aktiveres af lys, og opnår betydelig tumorreduktion med minimale off-target-effekter. Sådanne undersøgelser understreger KPL-4-cellernes anvendelighed i evalueringen af nye behandlingsmetoder for HER2-positiv brystkræft.

Væv
Bryst
Sygdom
Inflammatorisk karcinom i brystet
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
  • KPL4

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
MSI-status
Stabil (MSS)

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KPL-4 (Cytion katalognummer 305578)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_5310

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS uden calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med TrypLE Express, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
52 år
Etnisk tilhørsforhold
Japansk