Przejdź do treści
KPL-4
Chusteczka
Pierś
Choroba
Rak zapalny piersi
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
KPL4

Dokumenty

KPL-4

Cell line · Numer produktu 305578

The KPL-4 cell line is a human breast cancer model originally derived from the malignant pleural effusion of a patient with inflammatory breast cancer. Th...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa KPL-4 jest ludzkim modelem raka piersi pierwotnie uzyskanym ze złośliwego wysięku opłucnowego pacjentki z zapalnym rakiem piersi. Ta linia komórkowa wykazuje nadekspresję i amplifikację HER2 (ErbB-2), a także ekspresję innych receptorów z rodziny ErbB, w tym HER1 (EGFR) i HER3. Takie cechy sprawiają, że jest on szczególnie przydatny do badania mechanizmów molekularnych leżących u podstaw agresywnych HER2-dodatnich raków piersi i testowania terapii celowanych.

Komórki KPL-4 są wysoce nowotworowe i zostały wykorzystane do stworzenia modeli ksenoprzeszczepów u myszy z niedoborem odporności. Modele te wykazały, że guzy KPL-4 wydzielają znaczne ilości interleukiny-6 (IL-6), przyczyniając się do kacheksji u zwierząt-gospodarzy. Wydzielanie IL-6 koreluje z ciężarem guza, podkreślając ogólnoustrojowe skutki biologii guza w nowotworach HER2-dodatnich. Co ważne, komórki KPL-4 reagują na terapie anty-HER2, takie jak trastuzumab, chociaż skuteczność tych terapii in vivo jest zmienna, potencjalnie ze względu na agresywny charakter tego modelu raka.

Linia komórkowa została również wykorzystana w zaawansowanych badaniach terapeutycznych. Na przykład, fotoaktywujące koniugaty przeciwciał i leków (AMDC) ukierunkowane na HER2 wykazały skuteczność w modelach ksenograftów KPL-4. Terapie te łączą cząsteczki wiążące specyficzne dla HER2 z cytotoksycznymi ładunkami aktywowanymi światłem, osiągając znaczną redukcję guza przy minimalnych efektach poza celem. Takie badania podkreślają użyteczność komórek KPL-4 w ocenie nowych metod terapeutycznych dla HER2-dodatniego raka piersi.

Chusteczka
Pierś
Choroba
Rak zapalny piersi
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
  • KPL4

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Stan MSI
Stabilny (MSS)

04Identyfikatory

Źródło
KPL-4 (numer katalogowy Cytion 305578)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5310

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki preparatem TrypLE Express, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozostawić komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut w celu ich odłączenia. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
52 lata
Pochodzenie etniczne
Japoński