Tartalomra ugrás
KPL-4
Szövet
Mell
Betegség
Mell gyulladásos karcinóma
Áttétes hely
Mellhártya folyadékgyülem
Szinonimák
KPL4

Dokumentumok

KPL-4

Cell line · Termékszám 305578

The KPL-4 cell line is a human breast cancer model originally derived from the malignant pleural effusion of a patient with inflammatory breast cancer. Th...

€550.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A KPL-4 sejtvonal egy humán emlőrákmodell, amely eredetileg egy gyulladásos emlőrákban szenvedő beteg rosszindulatú pleurális folyadékából származik. Ez a sejtvonal a HER2 (ErbB-2), valamint más ErbB-családba tartozó receptorok, köztük a HER1 (EGFR) és a HER3 túlzott expresszióját és amplifikációját mutatja. Ezek a jellemzők különösen fontossá teszik az agresszív HER2-pozitív emlőrákok hátterében álló molekuláris mechanizmusok tanulmányozásához és a célzott terápiák teszteléséhez.

A KPL-4 sejtek erősen tumorgenikusak, és immunhiányos egerekben xenograft modellek létrehozására használták őket. Ezek a modellek kimutatták, hogy a KPL-4 tumorok jelentős mennyiségű interleukin-6-ot (IL-6) választanak ki, ami hozzájárul a gazdaszervezet állatok kachexiájához. Az IL-6 szekréciója korrelál a tumorterheléssel, kiemelve a HER2-pozitív rákok tumorbiológiájának szisztémás hatásait. Fontos, hogy a KPL-4 sejtek reagálnak a HER2-ellenes terápiákra, például a trastuzumabra, bár e kezelések in vivo hatékonysága változó, ami valószínűleg e rákmodell agresszív jellegének köszönhető.

A sejtvonalat fejlett terápiás kutatásokban is hasznosították. Például a HER2-t célzó fotoaktiváló antitest-mimetikus gyógyszerkonjugátumok (AMDC-k) hatékonyságot mutattak a KPL-4 xenograft modellekben. Ezek a terápiák a HER2-specifikus kötőmolekulákat fény által aktivált citotoxikus hasznos anyagokkal kombinálják, és minimális célponton kívüli hatás mellett jelentős tumorcsökkentést érnek el. Ezek a vizsgálatok aláhúzzák a KPL-4 sejtek hasznosságát a HER2-pozitív emlőrák új terápiás módszereinek értékelésében.

Szövet
Mell
Betegség
Mell gyulladásos karcinóma
Áttétes hely
Mellhártya folyadékgyülem
Szinonimák
  • KPL4

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
MSI állapot
Stabil (MSS)

04Azonosítók

Hivatkozás
KPL-4 (Cytion katalógusszám: 305578)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_5310

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen TrypLE Express-szel, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. Hagyjuk a sejteket 8-10 percig szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
52 év
Etnikai hovatartozás
Japán