Přejít na obsah
KPL-4
Tkáň
Prsa
Nemoc
Zánětlivý karcinom prsu
Místo metastázy
Pleurální výpotek
Synonyma
KPL4

Dokumenty

KPL-4

Cell line · Číslo výrobku 305578

The KPL-4 cell line is a human breast cancer model originally derived from the malignant pleural effusion of a patient with inflammatory breast cancer. Th...

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie KPL-4 je model lidského karcinomu prsu původně odvozený z maligního pleurálního výpotku pacientky se zánětlivým karcinomem prsu. Tato buněčná linie vykazuje nadměrnou expresi a amplifikaci HER2 (ErbB-2) a expresi dalších receptorů rodiny ErbB, včetně HER1 (EGFR) a HER3. Díky těmto vlastnostem je obzvláště vhodná pro studium molekulárních mechanismů, které jsou základem agresivních HER2-pozitivních karcinomů prsu, a pro testování cílených terapií.

Buňky KPL-4 jsou vysoce tumorigenní a byly použity k vytvoření xenograftových modelů u imunodeficitních myší. Tyto modely prokázaly, že nádory KPL-4 vylučují značné množství interleukinu-6 (IL-6), což přispívá ke kachexii hostitelských zvířat. Sekrece IL-6 koreluje s nádorovou zátěží, což poukazuje na systémové účinky nádorové biologie u HER2-pozitivních nádorů. Důležité je, že buňky KPL-4 reagují na anti-HER2 terapii, jako je trastuzumab, ačkoli účinnost této léčby in vivo je proměnlivá, což je potenciálně způsobeno agresivní povahou tohoto modelu rakoviny.

Tato buněčná linie byla rovněž využita v pokročilém terapeutickém výzkumu. Například fotoaktivující konjugáty protilátek a mimetických léčiv (AMDC) zaměřené na HER2 prokázaly účinnost na xenograftových modelech KPL-4. Tyto terapie kombinují vazebné molekuly specifické pro HER2 s cytotoxickým užitečným zatížením aktivovaným světlem, čímž dosahují významného zmenšení nádoru s minimálními účinky mimo cíl. Tyto studie podtrhují užitečnost buněk KPL-4 při hodnocení nových terapeutických modalit HER2-pozitivního karcinomu prsu.

Tkáň
Prsa
Nemoc
Zánětlivý karcinom prsu
Místo metastázy
Pleurální výpotek
Synonyma
  • KPL4

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Stav MSI
Stabilní (MSS)

04Identifikátory

Citace
KPL-4 (katalogové číslo Cytion 305578)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5310

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem TrypLE Express, a to 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
52 let
Etnická příslušnost
Japonský