Siirry sisältöön
KPL-4
Kudos
Rinta
Sairaus
Rintojen tulehduksellinen karsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
KPL4

Asiakirjat

KPL-4

Cell line · Tuotenumero 305578

The KPL-4 cell line is a human breast cancer model originally derived from the malignant pleural effusion of a patient with inflammatory breast cancer. Th...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

KPL-4-solulinja on ihmisen rintasyövän malli, joka on alun perin peräisin tulehduksellista rintasyöpää sairastavan potilaan pahanlaatuisesta pleuraeritteestä. Tässä solulinjassa esiintyy HER2:n (ErbB-2) yliekspressiota ja monistumista sekä muiden ErbB-perheen reseptorien, kuten HER1:n (EGFR) ja HER3:n, ilmentymistä. Näiden ominaisuuksien vuoksi se on erityisen tärkeä aggressiivisen HER2-positiivisen rintasyövän taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimisessa ja kohdennettujen hoitojen testaamisessa.

KPL-4-solut ovat erittäin tumorigeenisiä, ja niitä on käytetty ksenograft-mallien luomiseen immuunipuutteisissa hiirissä. Näissä malleissa on osoitettu, että KPL-4-kasvaimet erittävät merkittäviä määriä interleukiini-6:ta (IL-6), mikä edistää isäntäeläinten kakeksiaa. IL-6:n eritys korreloi kasvaimen taakan kanssa, mikä korostaa HER2-positiivisten syöpien kasvainbiologian systeemisiä vaikutuksia. On tärkeää, että KPL-4-solut reagoivat HER2-vastaiseen hoitoon, kuten trastutsumabiin, vaikka näiden hoitojen teho in vivo vaihtelee, mikä saattaa johtua tämän syöpämallin aggressiivisesta luonteesta.

Solulinjaa on hyödynnetty myös kehittyneessä terapeuttisessa tutkimuksessa. Esimerkiksi HER2:een kohdistuvat valoa aktivoivat vasta-aine-mimeettiset lääkeainekonjugaatit (AMDC) ovat osoittaneet tehoa KPL-4-ksenotransplantaattimalleissa. Näissä hoitomuodoissa HER2-spesifiset sitoutuvat molekyylit yhdistetään valon aktivoimiin sytotoksisiin aineisiin, jotka vähentävät kasvainta merkittävästi ja joilla on minimaaliset vaikutuksen kohteen ulkopuoliset vaikutukset. Tällaiset tutkimukset korostavat KPL-4-solujen hyödyllisyyttä HER2-positiivisen rintasyövän uusien hoitomuotojen arvioinnissa.

Kudos
Rinta
Sairaus
Rintojen tulehduksellinen karsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • KPL4

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
MSI-tila
Vakaa (MSS)

04Tunnisteet

Lähdeviite
KPL-4 (Cytionin luettelonumero 305578)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_5310

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan TrypLE Express -valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen sekoita solut varovasti 10 ml:lla elatusainetta niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoi sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
52 vuotta
Etnisyys
Japanilainen