KPL-4

A linhagem celular KPL-4 é um modelo de câncer de mama humano originalmente derivado do derrame pleural maligno de uma paciente com câncer de mama inflamatório. Essa linha celular apresenta superexpressão e amplificação do HER2 (ErbB-2), bem como expressão de outros receptores da família ErbB, incluindo o HER1 (EGFR) e o HER3. Tais características a tornam particularmente relevante para o estudo dos mecanismos moleculares subjacentes aos cânceres de mama HER2-positivos agressivos e para o teste de terapias direcionadas.

As células KPL-4 são altamente tumorigênicas e têm sido utilizadas para estabelecer modelos de xenoenxertos em camundongos imunodeficientes. Esses modelos demonstraram que os tumores KPL-4 secretam quantidades significativas de interleucina-6 (IL-6), contribuindo para a caquexia nos animais hospedeiros. A secreção de IL-6 está correlacionada com a carga tumoral, destacando os efeitos sistêmicos da biologia tumoral nos cânceres HER2-positivos. É importante ressaltar que as células KPL-4 respondem a terapias anti-HER2, como o trastuzumab, embora a eficácia in vivo desses tratamentos seja variável, possivelmente devido à natureza agressiva desse modelo de câncer.

A linhagem celular também tem sido utilizada em pesquisas terapêuticas avançadas. Por exemplo, conjugados de fármacos miméticos de anticorpos (AMDCs) fotoativáveis direcionados ao HER2 demonstraram eficácia em modelos de xenoenxertos de KPL-4. Essas terapias combinam moléculas de ligação específicas para HER2 com cargas citotóxicas ativadas pela luz, alcançando uma redução significativa do tumor com efeitos fora do alvo mínimos. Tais estudos ressaltam a utilidade das células KPL-4 na avaliação de novas modalidades terapêuticas para o câncer de mama HER2-positivo.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.