Ga naar de inhoud
KPL-4
Weefsel
Borst
Ziekte
Borst inflammatoir carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
KPL4

Documenten

KPL-4

Cell line · Productnummer 305578

The KPL-4 cell line is a human breast cancer model originally derived from the malignant pleural effusion of a patient with inflammatory breast cancer. Th...

€550.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De KPL-4 cellijn is een humaan borstkankermodel dat oorspronkelijk is afgeleid van de kwaadaardige pleurale effusie van een patiënt met inflammatoire borstkanker. Deze cellijn vertoont overexpressie en amplificatie van HER2 (ErbB-2), evenals expressie van andere receptoren uit de ErbB-familie, waaronder HER1 (EGFR) en HER3. Deze eigenschappen maken het bijzonder relevant voor het bestuderen van de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan agressieve HER2-positieve borstkankers en het testen van doelgerichte therapieën.

KPL-4 cellen zijn zeer tumorigenic en zijn gebruikt om xenograft-modellen in immunodeficiënte muizen te maken. Deze modellen hebben aangetoond dat KPL-4 tumoren aanzienlijke hoeveelheden interleukine-6 (IL-6) afscheiden, wat bijdraagt aan cachexie bij gastheren. De uitscheiding van IL-6 correleert met de tumorbelasting, wat de systemische effecten van tumorbiologie in HER2-positieve kankers benadrukt. Belangrijk is dat KPL-4 cellen reageren op anti-HER2 therapieën zoals trastuzumab, hoewel de in vivo werkzaamheid van deze behandelingen varieert, mogelijk door de agressieve aard van dit kankermodel.

De cellijn is ook gebruikt in geavanceerd therapeutisch onderzoek. Zo zijn fotoactiverende antilichaam-mimetische geneesmiddelconjugaten (AMDC's) gericht tegen HER2 werkzaam gebleken in KPL-4 xenograftmodellen. Deze therapieën combineren HER2-specifieke bindingsmoleculen met cytotoxische payloads die worden geactiveerd door licht, waardoor een significante reductie van de tumor wordt bereikt met minimale off-target effecten. Dergelijke studies onderstrepen het nut van KPL-4 cellen voor het evalueren van nieuwe therapeutische modaliteiten voor HER2-positieve borstkanker.

Weefsel
Borst
Ziekte
Borst inflammatoir carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
  • KPL4

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
MSI-status
Stabiel (MSS)

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
KPL-4 (Cytion catalogusnummer 305578)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_5310

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met TrypLE Express, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Meng de cellen na incubatie voorzichtig met 10 ml medium om ze te resuspenderen en centrifugeer vervolgens gedurende 3 minuten bij 300xg. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
52 jaar
Etnische afkomst
Japans