Ir diretamente para o conteúdo
KPL-4
Tecido
Peito
Doença
Carcinoma inflamatório da mama
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
KPL4

Documentos

KPL-4

Cell line · Número do produto 305578

The KPL-4 cell line is a human breast cancer model originally derived from the malignant pleural effusion of a patient with inflammatory breast cancer. Th...

€550.00sem impostos nem portes de envio
Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular KPL-4 é um modelo de cancro da mama humano originalmente derivado do derrame pleural maligno de uma doente com cancro da mama inflamatório. Esta linha celular apresenta uma sobreexpressão e amplificação do HER2 (ErbB-2), bem como a expressão de outros receptores da família ErbB, incluindo o HER1 (EGFR) e o HER3. Estas caraterísticas tornam-na particularmente relevante para o estudo dos mecanismos moleculares subjacentes aos cancros da mama agressivos HER2-positivos e para o teste de terapias orientadas.

As células KPL-4 são altamente tumorigénicas e têm sido utilizadas para estabelecer modelos de xenoenxertos em ratos imunodeficientes. Estes modelos demonstraram que os tumores KPL-4 segregam quantidades significativas de interleucina-6 (IL-6), contribuindo para a caquexia nos animais hospedeiros. A secreção de IL-6 está correlacionada com a carga tumoral, realçando os efeitos sistémicos da biologia tumoral nos cancros HER2-positivos. É importante notar que as células KPL-4 respondem a terapias anti-HER2, como o trastuzumab, embora a eficácia in vivo destes tratamentos seja variável, potencialmente devido à natureza agressiva deste modelo de cancro.

A linha celular também tem sido utilizada em investigação terapêutica avançada. Por exemplo, os conjugados de fármacos miméticos de anticorpos fotoactivadores (AMDC) que visam o HER2 demonstraram eficácia em modelos de xenoenxertos de KPL-4. Estas terapias combinam moléculas de ligação específicas do HER2 com cargas citotóxicas activadas pela luz, conseguindo uma redução significativa do tumor com efeitos mínimos fora do alvo. Estes estudos sublinham a utilidade das células KPL-4 na avaliação de novas modalidades terapêuticas para o cancro da mama HER2-positivo.

Tecido
Peito
Doença
Carcinoma inflamatório da mama
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
  • KPL4

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Estado do MSI
Estável (MSS)

04Identificadores

Referência
KPL-4 (número de catálogo Cytion 305578)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5310

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Para frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e, para frascos T75, utilizar 5-10 ml. De seguida, cobrir completamente as células com TrypLE Express, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
52 anos
Etnia
Japonês