Skip to content
KPL-4
Tissue
เต้านม
Disease
มะเร็งเต้านมชนิดอักเสบ
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
KPL4

Documents

KPL-4

Cell line · Product number 305578

The KPL-4 cell line is a human breast cancer model originally derived from the malignant pleural effusion of a patient with inflammatory breast cancer. Th...

€550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ KPL-4 เป็นแบบจำลองมะเร็งเต้านมของมนุษย์ที่ได้มาจากน้ำในช่องเยื่อหุ้มปอดที่ผิดปกติของผู้ป่วยที่เป็นมะเร็งเต้านมอักเสบ เซลล์ไลน์นี้แสดงการเพิ่มการแสดงออกและการขยายตัวของ HER2 (ErbB-2) รวมถึงการแสดงออกของตัวรับในตระกูล ErbB อื่น ๆ เช่น HER1 (EGFR) และ HER3 ลักษณะดังกล่าวทำให้เซลล์ไลน์นี้มีความสำคัญเป็นพิเศษสำหรับการศึกษาเชิงโมเลกุลของกลไกที่อยู่เบื้องหลังมะเร็งเต้านมชนิด HER2-positive ที่มีความรุนแรง และการทดสอบการรักษาแบบมุ่งเป้า

เซลล์ KPL-4 มีความสามารถในการก่อเนื้องอกสูงมากและถูกนำมาใช้สร้างแบบจำลองการปลูกถ่ายในหนูที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่อง แบบจำลองเหล่านี้แสดงให้เห็นว่าเนื้องอกของ KPL-4 ปล่อยสารอินเตอร์ลิวคิน-6 (IL-6) ในปริมาณมาก ซึ่งมีส่วนทำให้เกิดภาวะแคคเซียมในสัตว์เจ้าบ้าน การหลั่ง IL-6 มีความสัมพันธ์กับภาระของเนื้องอก ซึ่งเน้นย้ำถึงผลกระทบทางระบบของชีววิทยาของเนื้องอกในมะเร็งที่มี HER2 เป็นบวกที่สำคัญคือ เซลล์ KPL-4 ตอบสนองต่อการรักษาด้วยยาต้าน HER2 เช่น ทราสทูซูแมบ แม้ว่าประสิทธิภาพในการรักษาในร่างกายจริงจะมีความแตกต่างกันไป ซึ่งอาจเกิดจากลักษณะที่รุนแรงของแบบจำลองมะเร็งชนิดนี้

สายเซลล์นี้ยังถูกนำมาใช้ประโยชน์ในการวิจัยการบำบัดขั้นสูงอีกด้วยตัวอย่างเช่น การกระตุ้นด้วยแสงของยาที่จับกับแอนติบอดีเลียนแบบ (AMDCs) ที่มุ่งเป้าไปที่ HER2 ได้แสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพในแบบจำลอง KPL-4 xenograft การบำบัดเหล่านี้รวมโมเลกุลที่จับกับ HER2 เฉพาะเจาะจงกับสารที่มีพิษต่อเซลล์ซึ่งถูกกระตุ้นด้วยแสง ทำให้เกิดการลดขนาดเนื้องอกอย่างมีนัยสำคัญโดยมีผลข้างเคียงนอกเป้าหมายน้อยมาก การศึกษาดังกล่าวเน้นย้ำถึงประโยชน์ของเซลล์ KPL-4 ในการประเมินวิธีการรักษาแบบใหม่สำหรับมะเร็งเต้านมที่มี HER2 เป็นบวก

Tissue
เต้านม
Disease
มะเร็งเต้านมชนิดอักเสบ
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
  • KPL4

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
MSI status
เสถียร (MSS)

04Identifiers

Citation
KPL-4 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305578)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_5310

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย TrypLE Express โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (g) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเลี้ยงเซลล์ใหม่ที่บรรจุอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
52 ปี
Ethnicity
ญี่ปุ่น