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KPL-4
Gewebe
Brust
Krankheit
Entzündliches Mammakarzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
KPL4

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KPL-4

Cell line · Artikelnummer 305578

The KPL-4 cell line is a human breast cancer model originally derived from the malignant pleural effusion of a patient with inflammatory breast cancer. Th...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die KPL-4-Zelllinie ist ein menschliches Brustkrebsmodell, das ursprünglich aus dem bösartigen Pleuraerguss einer Patientin mit entzündlichem Brustkrebs gewonnen wurde. Diese Zelllinie weist eine Überexpression und Amplifikation von HER2 (ErbB-2) sowie eine Expression anderer Rezeptoren der ErbB-Familie, einschließlich HER1 (EGFR) und HER3, auf. Diese Eigenschaften machen sie besonders relevant für die Untersuchung der molekularen Mechanismen, die aggressiven HER2-positiven Brustkrebserkrankungen zugrunde liegen, und für die Erprobung gezielter Therapien.

KPL-4-Zellen sind hochgradig tumorerzeugend und wurden zur Herstellung von Xenotransplantationsmodellen in immundefizienten Mäusen verwendet. Diese Modelle haben gezeigt, dass KPL-4-Tumore erhebliche Mengen an Interleukin-6 (IL-6) absondern, was zur Kachexie der Wirtstiere beiträgt. Die Sekretion von IL-6 korreliert mit der Tumorlast und verdeutlicht die systemischen Auswirkungen der Tumorbiologie bei HER2-positiven Krebsarten. Wichtig ist, dass KPL-4-Zellen auf Anti-HER2-Therapien wie Trastuzumab ansprechen, obwohl die In-vivo-Wirksamkeit dieser Behandlungen variabel ist, was möglicherweise auf die aggressive Natur dieses Krebsmodells zurückzuführen ist.

Die Zelllinie wurde auch in der fortgeschrittenen therapeutischen Forschung eingesetzt. So haben beispielsweise photoaktivierende antikörpermimetische Arzneimittelkonjugate (AMDCs), die auf HER2 abzielen, in KPL-4-Xenotransplantationsmodellen Wirksamkeit gezeigt. Diese Therapien kombinieren HER2-spezifische Bindungsmoleküle mit zytotoxischen Nutzlasten, die durch Licht aktiviert werden und eine signifikante Tumorverkleinerung bei minimalen Off-Target-Effekten erzielen. Diese Studien unterstreichen die Nützlichkeit von KPL-4-Zellen bei der Evaluierung neuartiger therapeutischer Modalitäten für HER2-positiven Brustkrebs.

Gewebe
Brust
Krankheit
Entzündliches Mammakarzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
  • KPL4

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
MSI-Status
Stabil (MSS)

04Bezeichner

Quellenangabe
KPL-4 (Cytion-Katalognummer 305578)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_5310

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Verwenden Sie für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml. Bedecken Sie dann die Zellen vollständig mit TrypLE Express, wobei Sie 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwenden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
52 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Japanisch