İçeriğe atla
KPL-4
Doku
Meme
Hastalık
Meme iltihaplı karsinomu
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Eş anlamlılar
KPL4

KPL-4

Cell line · Ürün numarası 305578

The KPL-4 cell line is a human breast cancer model originally derived from the malignant pleural effusion of a patient with inflammatory breast cancer. Th...

€550.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

KPL-4 hücre hattı, başlangıçta inflamatuar meme kanserli bir hastanın malign plevral efüzyonundan türetilen bir insan meme kanseri modelidir. Bu hücre hattı, HER2'nin (ErbB-2) aşırı ekspresyonu ve amplifikasyonunun yanı sıra HER1 (EGFR) ve HER3 dahil olmak üzere diğer ErbB ailesi reseptörlerinin ekspresyonunu sergiler. Bu özellikler, agresif HER2-pozitif meme kanserlerinin altında yatan moleküler mekanizmaların incelenmesi ve hedefe yönelik tedavilerin test edilmesi için özellikle önemlidir.

KPL-4 hücreleri yüksek oranda tümörijeniktir ve immün yetmezlikli farelerde ksenograft modelleri oluşturmak için kullanılmıştır. Bu modeller, KPL-4 tümörlerinin önemli miktarda interlökin-6 (IL-6) salgıladığını ve konakçı hayvanlarda kaşeksiye katkıda bulunduğunu göstermiştir. IL-6 salgılanması tümör yükü ile ilişkilidir ve HER2-pozitif kanserlerde tümör biyolojisinin sistemik etkilerini vurgulamaktadır. Daha da önemlisi, KPL-4 hücreleri trastuzumab gibi anti-HER2 tedavilerine yanıt verir, ancak bu tedavilerin in vivo etkinliği değişkendir ve potansiyel olarak bu kanser modelinin agresif doğasından kaynaklanmaktadır.

Hücre hattı ayrıca ileri terapötik araştırmalarda da kullanılmıştır. Örneğin, HER2'yi hedefleyen fotoaktive edici antikor-mimetik ilaç konjugatları (AMDC'ler) KPL-4 ksenograft modellerinde etkinlik göstermiştir. Bu tedaviler, HER2'ye özgü bağlayıcı molekülleri ışıkla aktive edilen sitotoksik yüklerle birleştirerek minimum hedef dışı etkilerle önemli tümör azalması sağlar. Bu tür çalışmalar, HER2-pozitif meme kanseri için yeni terapötik modalitelerin değerlendirilmesinde KPL-4 hücrelerinin faydasının altını çizmektedir.

Doku
Meme
Hastalık
Meme iltihaplı karsinomu
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Eş anlamlılar
  • KPL4

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
MSI durumu
Kararlı (MSS)

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
KPL-4 (Cytion katalog numarası 305578)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_5310

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri TrypLE Express ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
52 yıl
Etnik köken
Japonca