
- Tissue
- Sein
- Disease
- Carcinome inflammatoire du sein
- Metastatic site
- Épanchement pleural
- Synonyms
- KPL4
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KPL-4
Cell line · Product number 305578
The KPL-4 cell line is a human breast cancer model originally derived from the malignant pleural effusion of a patient with inflammatory breast cancer. Th...
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01General information
- Description
La lignée cellulaire KPL-4 est un modèle de cancer du sein humain issu à l’origine d’un épanchement pleural malin chez une patiente atteinte d’un cancer du sein inflammatoire. Cette lignée cellulaire présente une surexpression et une amplification du gène HER2 (ErbB-2), ainsi que l’expression d’autres récepteurs de la famille ErbB, notamment HER1 (EGFR) et HER3. Ces caractéristiques la rendent particulièrement pertinente pour l’étude des mécanismes moléculaires sous-jacents aux cancers du sein HER2-positifs agressifs et pour l’évaluation de thérapies ciblées.
Les cellules KPL-4 sont hautement tumorigènes et ont été utilisées pour établir des modèles de xénogreffes chez des souris immunodéficientes. Ces modèles ont démontré que les tumeurs KPL-4 sécrètent des quantités importantes d’interleukine-6 (IL-6), contribuant ainsi à la cachexie chez les animaux hôtes. La sécrétion d’IL-6 est en corrélation avec la charge tumorale, ce qui met en évidence les effets systémiques de la biologie tumorale dans les cancers HER2-positifs. Il est important de noter que les cellules KPL-4 répondent aux thérapies anti-HER2 telles que le trastuzumab, bien que l’efficacité in vivo de ces traitements soit variable, ce qui pourrait s’expliquer par la nature agressive de ce modèle de cancer.
Cette lignée cellulaire a également été mise à profit dans la recherche thérapeutique de pointe. Par exemple, des conjugués médicamenteux mimant les anticorps (AMDC) photoactivables ciblant HER2 ont démontré leur efficacité dans des modèles de xénogreffes KPL-4. Ces thérapies combinent des molécules de liaison spécifiques à HER2 avec des charges cytotoxiques activées par la lumière, ce qui permet d’obtenir une réduction significative de la tumeur avec un minimum d’effets hors cible. De telles études soulignent l’utilité des cellules KPL-4 dans l’évaluation de nouvelles modalités thérapeutiques pour le cancer du sein HER2-positif.
- Tissue
- Sein
- Disease
- Carcinome inflammatoire du sein
- Metastatic site
- Épanchement pleural
- Synonyms
- KPL4
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De type épithélial
- MSI status
- Stable (MSS)
04Identifiers
- Citation
- KPL-4 (numéro de catalogue Cytion 305578)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_5310
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules de TrypLE Express, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Fluid renewal
- 2 fois par semaine
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
07Donor
- Donor age
- 52 ans
- Ethnicity
- Japonais
08Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes