Preskoči na vsebino
KPL-4
Tkivo
Prsi
Bolezen
Vnetni karcinom dojk
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
KPL4

Dokumenti

KPL-4

Cell line · Številka izdelka 305578

The KPL-4 cell line is a human breast cancer model originally derived from the malignant pleural effusion of a patient with inflammatory breast cancer. Th...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija KPL-4 je model človeškega raka dojke, ki je bil prvotno pridobljen iz malignega plevralnega izliva bolnika z vnetnim rakom dojke. Ta celična linija kaže prekomerno izražanje in pomnožitev HER2 (ErbB-2) ter izražanje drugih receptorjev družine ErbB, vključno s HER1 (EGFR) in HER3. Zaradi teh lastnosti je še posebej pomembna za preučevanje molekularnih mehanizmov, na katerih temelji agresivni HER2-pozitivni rak dojk, in za testiranje ciljnih terapij.

Celice KPL-4 so zelo tumorogene in so bile uporabljene za vzpostavitev ksenografskih modelov na imunsko pomanjkljivih miših. Ti modeli so pokazali, da tumorji KPL-4 izločajo velike količine interlevkina-6 (IL-6), kar prispeva h kaheksiji pri gostiteljskih živalih. Izločanje IL-6 je povezano z bremenom tumorja, kar poudarja sistemske učinke tumorske biologije pri HER2-pozitivnih rakih. Pomembno je, da se celice KPL-4 odzivajo na terapije proti HER2, kot je trastuzumab, čeprav je učinkovitost teh terapij in vivo različna, kar je lahko posledica agresivne narave tega modela raka.

Celična linija je bila uporabljena tudi v naprednih terapevtskih raziskavah. Na primer, fotoaktivni konjugati s protitelesi in mimetičnimi zdravili (AMDC), usmerjeni proti HER2, so pokazali učinkovitost v ksenografskih modelih KPL-4. Te terapije združujejo vezavne molekule, specifične za HER2, s citotoksičnimi koristnimi snovmi, ki se aktivirajo s svetlobo, s čimer se doseže znatno zmanjšanje tumorja z minimalnimi učinki zunaj cilja. Takšne študije poudarjajo uporabnost celic KPL-4 pri ocenjevanju novih terapevtskih načinov zdravljenja HER2-pozitivnega raka dojk.

Tkivo
Prsi
Bolezen
Vnetni karcinom dojk
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
  • KPL4

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Stanje MSI
Stabilno (MSS)

04Identifikatorji

Navajanje vira
KPL-4 (kataloška številka Cytion 305578)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5310

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice v celoti prekrijte z raztopino TrypLE Express, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
52 let
Etnična pripadnost
Japonski