الانتقال إلى المحتوى
KPL-4
الأنسجة
الثدي
المرض
سرطان الثدي الالتهابي
موقع الانتشار
الانصباب الجنبي
المرادفات
KPL4

المستندات

KPL-4

Cell line · رقم المنتج 305578

The KPL-4 cell line is a human breast cancer model originally derived from the malignant pleural effusion of a patient with inflammatory breast cancer. Th...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

الخط الخلوي KPL-4 هو نموذج لسرطان الثدي البشري مشتق أصلاً من الانصباب الجنبي الخبيث لمريضة مصابة بسرطان الثدي الالتهابي. يُظهر هذا الخط الخلوي إفراطاً في التعبير عن HER2 (ErbB-2) وتضخيمه، بالإضافة إلى التعبير عن مستقبلات عائلة ErbB الأخرى، بما في ذلك HER1 (EGFR) و HER3. هذه الخصائص تجعلها ذات أهمية خاصة لدراسة الآليات الجزيئية الكامنة وراء سرطانات الثدي العدوانية الإيجابية لـ HER2 واختبار العلاجات الموجهة.

إن خلايا KPL-4 شديدة التولّد الورمي وقد استُخدمت لإنشاء نماذج الطعم المجهري في الفئران التي تعاني من نقص المناعة. وقد أظهرت هذه النماذج أن أورام KPL-4 تفرز كميات كبيرة من الإنترلوكين 6 (IL-6)، مما يساهم في حدوث دنف في الحيوانات المضيفة. ويرتبط إفراز الإنترلوكين-6 بعبء الورم، مما يسلط الضوء على التأثيرات الجهازية لبيولوجيا الورم في السرطانات الإيجابية لـ HER2. والأهم من ذلك أن خلايا KPL-4 تستجيب للعلاجات المضادة لـ HER2 مثل تراستوزوماب، على الرغم من أن فعالية هذه العلاجات في الجسم الحي متغيرة، ربما بسبب الطبيعة العدوانية لهذا النموذج السرطاني.

كما تمت الاستفادة من هذا الخط الخلوي في الأبحاث العلاجية المتقدمة. على سبيل المثال، أظهرت متقارنات الأجسام المضادة المحاكِية للأدوية الضوئية (AMDCs) التي تستهدف HER2 فعالية في نماذج الطعم المجهري KPL-4. تجمع هذه العلاجات بين جزيئات الربط الخاصة بـ HER2 مع حمولات سامة للخلايا يتم تنشيطها بالضوء، مما يحقق انخفاضًا كبيرًا في الورم مع الحد الأدنى من التأثيرات غير المستهدفة. تؤكد مثل هذه الدراسات على فائدة خلايا KPL-4 في تقييم الطرائق العلاجية الجديدة لسرطان الثدي الإيجابي لـ HER2.

الأنسجة
الثدي
المرض
سرطان الثدي الالتهابي
موقع الانتشار
الانصباب الجنبي
المرادفات
  • KPL4

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
حالة MSI
مستقر (MSS)

04المعرّفات

المرجع
KPL-4 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305578)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_5310

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم قم بتغطية الخلايا بالكامل بمادة TrypLE Express باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
52 سنة
الأصل العرقي
ياباني